张彦婷，吴 楠，刘玉梅，王晓清，刘国民，陈超英

（1.金宇保灵生物药品有限公司，内蒙古 呼和浩特 010030；2.内蒙古呼和浩特市农牧业局，内蒙古 呼和浩特 010020）

O型、A型及Asia-1型口蹄疫病毒多重RT-PCR检测方法的建立

张彦婷1，吴 楠2，刘玉梅1，王晓清1，刘国民1，陈超英1

（1.金宇保灵生物药品有限公司，内蒙古 呼和浩特 010030；2.内蒙古呼和浩特市农牧业局，内蒙古 呼和浩特 010020）

根据口蹄疫病毒VP1基因序列，利用Primer Premier 5.0软件设计4条特异性引物，通过对退火温度等反应条件进行优化，建立能够同时扩增出O型、A型、Asia-1型口蹄疫病毒的多重RT-PCR检测方法。结果表明，建立的方法最低可以检测出约含1 pg/μL的病毒样品；该方法对猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒等其他相关病毒的检测结果均为阴性，特异性良好。建立的方法能够对口蹄疫O型、A型、Asia-1型病毒准确定型，可广泛用于口蹄疫病毒3个血清型的快速检测和分子流行病学调查。

口蹄疫O型病毒；口蹄疫A型病毒；口蹄疫Asia-1型病毒；多重RT-PCR

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄动物发生的烈性传染病，可感染70多种家养或野生哺乳动物，并对动物养殖业造成非常严重的经济损失。其中猪和牛的临床表现最严重，羊表现亚临床感染。世界动物卫生组织（OIE）将口蹄疫列为A类动物传染病之首，我国农业部也将其列为一类重大动物疫病。

口蹄疫病毒属于小RNA病毒科，病毒含正链RNA基因组，编码病毒聚蛋白。其血清型复杂多变，自20世纪20年代在法国和德国发现O、A、C 3个不同的血清型后，20世纪40年代和50年代Pirbright研究所又确认了3个南非型SAT 1～3和Asia-1型共7个血清型［1］。……