孙　丽　刘春秀　李全亭首都医科大学昌平教学医院检验科，北京102200

儿童血常规复检规则的制订及应用评价

孙丽刘春秀李全亭
首都医科大学昌平教学医院检验科，北京102200

目的建立Sysmex XS-800i血液分析仪适用于儿童血常规的复检规则。方法参照国际血液学复检专家组推荐的41条复检规则和首都医科大学昌平教学医院检验科（以下简称“我科”）现行的复检规则，结合儿童的生理病理特点，参照血液分析仪异常报警信息，建立适合儿童血常规复检规则。采用Sysmex XS-800i五分类血液分析仪检测623例标本，同时进行血涂片人工镜检，建立并评估儿童血常规复检规则。选取230例标本用于本复检规则有效性验证。结果试行儿童血常规复检规则复检率为64.7%，假阳性率为54.9%。假阳性标本占第1位的是异型淋巴。本研究应用ROC曲线（受试者工作曲线）评估异型淋巴Q-Flags报警及OTHER的特异性及灵敏度，调整异型淋巴Q-Flags报警阈值为225，OTHER阈值为0.85，为复片临界点。优化后的儿童血常规复检规则复检率为31.4%，假阳性率为20.4%，假阴性率为3.5%，且无血液恶性肿瘤漏诊。验证优化后的儿童血常规复检规则的有效性，结果为复检率为35.2%，假阳性率为26.1%，假阴性率为4.8%，且无血液病漏检。结论我科建立的儿童血常规复检规则经过评估和验证，证明适合儿童血常规复检要求，既保证报告质量，又提高了工作效率，为临床诊断提供了快速有力的依据。

复检规则；血细胞分析；儿童

［Abstract］Objective To establish proper review criteria for XS-800i automated hematology analyzer in children. Methods According to 41 rules of ISLH and XS-800i hematology analyzer current review rules of Department of Clinical Laboratory，Changping Teaching Hospital，Capital Medical University，based on children's physiological and pathological characteristics，proper review criteria for blood cell analysis in children were validated.623 blood specimens were detected by Sysmex XS-800i automated hematology analyzer，and were examined artificially under microscopy at the same time，the children's blood routine review criteria were established and evaluated.230 blood specimens were used for verification.Results The review rate of initial review criteria was 64.7%.The false positive rate was 54.9%. Atypical lymphocytes was mostly the cause in false positive samples.In the study，Q-Flags for atypical lymphocytes and specificity and sensitivity of OTHER were evaluated by ROC curve.The alarm threshold of Q-Flags for atypical lymphocytes was adjusted to 225 and OTHER was 0.85.After optimization，the re-examination rate was 31.4%，the false positive rate was 20.4%，the false negative rate was 3.5%and no diagnosis of malignant tumors was missed.Evaluation data of new review criteria showed that re-examination rate was 35.2%；the false positive rate was 26.1%；the false negative rate was 4.8%and no diagnosis of malignant tumors was missed.Conclusion Revise hematology review rule not only basically meets the re-examination rule characteristics in children but also improves work efficiency.It provides rapid and effective support for clinical diagnosis.

［Key words］Blood cell analysis review criteria；Hematology analyzer；Children

随着血液分析仪的普遍应用，其对细胞形态识别能力不足的问题，越来越受到关注［1-3］。为此，国际血液学复检专家组推荐了41条自动血细胞分析的复检规则［4］，但实际工作中需要根据血液分析仪类型及标本特点进行合理的筛选，从而制订适合本科室的血常规复检规则［5-6］。迄今为止，针对儿童血常规的复检规则国内外鲜有报道。因此，本研究参照首都医科大学昌平教学医院（以下简称“我院”）检验科现行血常规复检规则，结合儿童疾病的特点，形成了适合儿童的血常规复检规则，并通过了临床应用评价。

1　资料与方法

1.1一般资料

1.1.1标本来源随机抽取2015年7～11月到我院就诊的门诊及住院患儿853份标本，均为抗凝末梢全血标本，年龄为1 h～14岁；其中，623例标本用于复检规则的建立；230例标本用于复检规则有效性验证。

1.1.2仪器与试剂Sysmex公司生产的XS-800i自动血细胞分析仪，以及原装配套试剂、校准品及质控品。Olympus CH21显微镜购自日本奥林巴斯光学工业株式会社，瑞氏-吉姆萨染液购自贝索公司。

1.2方法

1.2.1仪器的校准与质控仪器每半年由厂家校准，并进行校准验证；在校准有效期内参加原卫生部及北京市室间质量评价，结果均合格。每日采用2个浓度水平质控品进行室内质量控制，在控后开始检测。

1.2.2镜检方法每份标本制备2张血涂片，瑞氏染液染色，由2名形态学经验丰富的中级职称人员按根据《全国临床检验操作规程》和《白细胞分类计数参考方法》［7-8］中制订的血涂片检测操作程序进行镜检，每人计数200个白细胞，取其均值为分类值。

1.2.3镜检阳性判断标准最终采用国内血液学复检专家小组统一的涂片镜检阳性判断标准［9］，镜检结果符合任何一项即为阳性。

1.2.4复检规则的制订总体目标：复检率≈30%，假阳性率＜20%，假阴性率＜5%。对试行复检规则进行统计分析，根据儿童血常规特点进行规则优化及调整，并对优化后复检规则的有效性进行验证。

1.3数据分析

采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析。采用受试者工作ROC曲线，确定Q-Flags和OTHER判断异型淋巴的最佳阈值。真阳性指触发任何一条复检规则且涂片镜检为阳性，假阳性指触发任何一条复检规则且涂片镜检报为阴性，假阴性指未触发任何一条复检规则且涂片镜检报为阳性，真阴性指未触发任何一条复检规则且涂片镜检为阴性。

2　结果

2.1儿科复检规则试行版的评估结果

根据检测仪器对有形细胞数量异常和形态异常的报警提示，以我院检验科现行通用的血常规复检规则为试行复检规则（表1）。其中，仪器Q-Flags报警提示的临界值均设在100。低于100判为阴性，任何一项Q-Flags值在100～300判为阳性报警。以镜检结果为金标准，依据试行的复检规则，在623例门诊及住院患儿血液标本中，需涂片复检的标本为403例，复检率为64.7%（403/623），假阳性率54.9%（342/623），真阳性率为9.8%（61/623），真阴性率33.2%（207/623），假阴性率为2.1%（13/623）。复检率及假阳性率过高，未达到制订的目标值。

表1　儿童血常规复检规则（试行）

2.2优化儿童血细胞分析复检规则

2.2.1降低复检率及假阳性率由于复检率和假阳性率过高，超出临床实验室的检测能力，造成工作效率低下，结果回报时间延迟。而降低复检率主要通过降低假阳性率来实现。本研究分析触发假阳性规则主要有①异型淋巴为51.5%（176/342）；②原始细胞为10.5%（36/342）；③未成熟粒细胞（IG）为7.8%（27/342）。其中，假阳性率占第1位的是异型淋巴。Sysmex xs-800i异型淋巴报警主要是异型淋巴Q-Flags报警及OTHER值。本研究应用ROC曲线，评估异型淋巴QFlags报警及OTHER的特异性及灵敏度。见表2、3。根据ROC曲线调整“异型淋巴”Q-Flags报警阈值为225，OTHER阈值为0.85，为复片临界点。

2.2.2减少假阴性率及血液病漏诊本研究触发假阳性规则第2位和第3位分别为原始细胞及IG，由于血液病、恶性肿瘤患者血液分析中易出现此类报警，故不能删除原始细胞、IG报警，易造成假阴性率升高及血液病等恶性疾病的漏诊。

2.2.3白细胞分类复检规则的改变儿童白细胞分类的复检规则采用百分比而非绝对值，以减少不同年龄段白细胞参考范围不同而对计数的影响，同时考虑儿童时期白细胞分类存在生理性交叉，所以将淋巴细胞百分比根据不同年龄段设置不同的复检标准。

表2　用ROC曲线评价异淋Q-Flags报警值的准确性

表3　用ROC曲线评价OTHER值判断异淋的准确性

2.2.4优化后的23条儿童血常规复检规则通过对试行复检规则的评估与优化，修订条款包括将“异型淋巴”Q-Flags报警阈值调整为225，OTHER阈值调整为0.85。白细胞分类的复检规则采用百分比，淋巴细胞百分比根据不同年龄段设置不同的复检标准。见表4。

2.3优化后复检规则的评估

623例血液标本应用优化后的儿科血常规复检规则，需涂片复检的标本为196例，复检率为31.4%（196/623），假阳性率为20.4%（127/623），假阴性率为3.5%（22/623），且无血液恶性肿瘤漏诊，达到预期目标。

2.4验证儿童血细胞分析复检规则

为验证制订的23条儿童血常规复检规则，采用门诊和住院标本共230例进行常规分析（包括疑似血液病标本），结果显示，复检率为35.2%（81/230），假阳性率为26.1%（60/230），假阴性率为4.8%（11/230），且无血液病漏检。

3　讨论

全自动血液分析仪虽有良好的分析性能，但由于细胞形态的多样性和复杂性，使仪器无法准确识别各种细胞［10-12］。为了解决这种局限性，需要根据仪器的类型和标本特点制订相应的复检规则［13-14］。儿童血细胞具有特殊的生理变化和病理变化，将成人的复检规则用于儿童血常规，易出现复检率及假阳性率过高，影响工作效率，延长报告回报时间，影响患儿的诊疗。所以，应根据儿科疾病诊疗的特点制订适合儿童血常规的复检规则。

表4　优化后的23条儿童血常规复检规则

我院检验科制订的试行儿童血常规复检规则中假阳性标本占第1位的是异型淋巴，为51.5%（176/ 342）。异型淋巴对于患儿疾病的判断和治疗有重要的作用［15-16］。儿科医师尤其关注异型淋巴的变化。Sysmex xs-800i采用半导体激光流式细胞分析技术，结合电阻抗法和核酸染色技术进行血细胞检测［17-18］。在形成的二维散点图上，异型淋巴细胞位于正常淋巴细胞上方，形成一个向上的拖尾形状。由于异型淋巴细胞的体积、颗粒及染色质与大淋巴细胞及单核细胞近似，仪器在鉴别此类细胞形态上存在困难，导致异型淋巴的报警敏感性高，而特异性低［19-20］。而提示异淋报警主要是OTHER值及异淋Q-Flags报警。本研究应用ROC曲线图，选取Youden指数（灵敏度+特异度-1）最大点为截点，寻求复片的最佳阈值。调整“异型淋巴”Q-Flags报警复检阈值为225，OTHER值的复检阈值为0.85。优化后假阳性率下降至20.4%及26.1%，且假阴性率为3.5%及4.8%，无血液病漏检。表明调整异淋报警初筛阈值，降低了假阳性率，能更有针对性的涂片镜检，提高诊断的准确性。

国际血液学复审协作组认为保证患者检测结果安全性的最大可接受的假阴性率＜5.0%，且具有诊断意义的重要参数不能出现假阴性。本研究发现虽然原始细胞、IG的报警假阳性率也较高，分别为10.5%（36/342）和7.8%（27/342），但由于血液病、恶性肿瘤患儿易出现此类报警，故不能删除原始细胞、IG报警，否则易造成血液病等恶性疾病的漏诊。本研究优化后复检规则假阴性率分别为为3.5%及4.8%，均小于5.0%，且均无血液病及恶性肿瘤细胞漏诊。

综上所述，儿童血常规复检规则需要根据儿童的特殊性及所使用的血液分析仪的性能特点而制订，同时着重关注儿科医师所关心的异型淋巴及血液病的问题。本研究优化后的儿童血常规复检规则经过评估和验证，证明适合儿童血常规复检要求，既保证报告质量，又提高了工作效率，为临床诊断提供快速有力的依据。

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Establishment and evaluation of blood cell analysis review criteria in children

SUN LiLIU ChunxiuLI Quanting
Department of Clinical Laboratory，Changping Teaching Hospital of Capital Medical University，Beijing102200，China

R446

A

1673-7210（2016）09（a）-0146-04

2016-06-02本文编辑：程铭）