尹全　李忆　宋君　王东　张富丽　刘文娟　常丽娟　雷绍荣　刘勇

摘要：为建立能同时检测4种转化体的多重PCR方法，选择进口转基因玉米最为常见的4种转化体Bt11、Bt176、MON810和MON863，利用国家标准中现行有效的转化体检测引物作为多重PCR检测体系引物，对多重PCR退火温度和引物浓度等进行优化。结果表明，多重PCR方法的适宜退火温度为58 ℃，适宜引物终浓度（μmol/L）配比为0.4∶0.4∶0.4∶0.4，通过建立快速、准确、高效的多重PCR为进口转基因玉米检测提供有价值的参考。

关键词：转基因玉米；多重PCR；筛查；检测

中图分类号：S513 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）06-1540-05

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.06.045

转基因玉米就是利用现代分子生物技术，将种属关系十分遥远且有用的基因导入需要改良的玉米遗传物质中，并使其后代表现出人们所追求的具有稳定遗传性状的玉米[1]。转基因玉米是目前全世界种植最多的4种转基因作物之一[2]。2011年全球转基因玉米种植面积仅次于转基因大豆，达到5 100万hm2，占转基因作物总面积的32%[3]。目前，中国批准Bt11、Bt176、MON810、MON863等15种转基因玉米进口用作加工原料[4]。本研究选择最为常见的转基因玉米Bt11、Bt176、MON810和MON863 4种转化体。转基因玉米Bt11是由先正达公司研发的，为兼具抗虫害及耐除草剂两种特性的品系，其转入的抗虫基因为Bt系列毒蛋白基因的cry1Ab抗虫基因，转入的耐草丁膦除草剂基因是草丁膦乙酰转移酶基因[5]。转基因玉米Bt176是由先正达公司研发的，为具抗虫害特性的品系，其转入的抗虫基因为Bt系列毒蛋白基因的cry1Ab抗虫基因[6]。转基因玉米MON810是由孟山都公司研发的，为具抗虫害特性的品系，其转入的抗虫基因为Bt系列毒蛋白基因的cry1Ab抗虫基因，可抗欧洲玉米螟[7]。……