徐艳　张家伟

【摘 要】为减少在植物组织培养中使用化学合成激素导致的环境污染，以铁皮石斛为材料，研究绿豆芽研磨液与化学合成激素对铁皮石斛组培苗诱导不定芽的影响。结果显示，混合使用合成激素0.5mg/L 6BA+0.1mg/L NAA+150g/L绿豆芽研磨液培养基的效果最好，而单独使用50g/L绿豆芽研磨液亦有良好效果。

【关键词】激素；组织培养；绿豆芽液

1 材料与方法

1.1 实验材料

绿豆芽（自制），仙斛1号组培苗（河源市裕森农林发展有限公司提供），6-BA，NAA，琼脂，糖，WPM；以食品搅拌机将绿豆芽搅拌成浆即为绿豆芽液。

1.2 实验方法

实验所用的铁皮石斛品种为仙斛1号，选择生长情况相近的铁皮石斛，去除头部和尾部，保留中间部分的茎节为实验材料。

空白组：以WPM为基础培养基，糖15g/L，琼脂8g/L。pH 6.8，121℃下灭菌25分钟。

实验组：以WPM为基础培养基，附加不同量的绿豆芽研磨液（50g/L、100g/L、150g/L、200g/L、250g/L），糖15g/L，琼脂8g/L。pH 6.8，121℃下灭菌25分钟。

对照组：

（1）以WPM为基础培养基，再附加不同量的绿豆芽研磨液（50、100、150、200、250g/L），糖15g/L，琼脂8g/L，另加化学合成激素0.5mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA。pH 6.8，121℃下灭菌25分钟。

（2）以WPM为基础培养基，添加化学合成激素0.5mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA，糖15g/L，琼脂8g/L。pH 6.8，121℃下灭菌25分钟。

2 结果与分析

取生长情况相似的铁皮石斛组培苗茎，插入不同激素组合的WPM培养基中，28℃培养10天，观察其不定芽萌发情况[1-3]。

2.1 无添加激素与绿豆芽研磨液培养基生长情况

在空白组实验中，实验材料在未添加绿豆芽研磨液、6-BA和 NAA的条件下，不定芽依然会萌动生长，但芽生长情况不均匀，芽苗细小。

2.2 单化学激素诱导铁皮石斛发芽情况

单独使用化学激素培养出的组织培养苗生长不均匀，部分芽没有萌发，芽生长不均匀，最长1.9厘米，最短0.4厘米。

2.3 绿豆芽提取物诱导铁皮石斛发芽情况

经分析发现，添加50g/L，100g/L，150g/L绿豆芽研磨液的不定芽萌发数量与生长情况均比空白组好。但若绿豆芽研磨液浓度高于200g/L，则不定芽芽萌发数量与生长情况比空白组差。添加50g/L绿豆芽研磨液的实验组（实验3）不定芽萌发数量与生长情况优于只添加化学激素的实验组（实验2）。随着绿豆芽研磨液添加量的增多，接种芽不生长的情况越严重，说明绿豆芽研磨液最适宜的使用量为50g/L。

2.4 化学激素联合绿豆芽提取物诱导铁皮石斛发芽情况

经过分析发现，培养基配添加6-BA 0.5mg/L、NAA 0.1mg/L、150g/L绿豆芽研磨液的实验组（实验10）芽增殖数和芽长均为最好，部分苗一个芽节萌发生长出五个芽。化学激素联合绿豆芽研磨液在诱导铁皮石斛不定芽萌发中效果优于单独使用化学激素或单独使用绿豆芽研磨液。

2.5 讨论

植物学理论认为，由于顶端生长优势，植物顶端幼芽含有较丰富的生长激素，因此植物幼芽可作为寻找纯天然植物组织培养激素的来源。目前食用植物的组织培养需要使用化学激素，可能导致食品安全问题，因此开发纯天然植物激素替代或部分替代化学激素将非常有必要。本次实验发现：添加50g/L绿豆芽研磨物的实验组（实验3）芽增殖数与芽长均优于添加化学激素的实验组（实验2），说明添加豆芽研磨液可引起不定芽较好的萌发和生长，在一定程度上与添加化学激素的作用类似。而添加6-BA 0.5mg/L、NAA 0.1mg/L、150g/L绿豆芽研磨液的实验组（实验10）芽增殖数和芽长均优于添加50g/L绿豆芽研磨物的实验组（实验3），说明纯天然植物激素联合化学激素可引发更好的不定芽萌发和生长。

【参考文献】

[1]秦廷豪.铁皮石斛的组织培养与快速繁殖.热带农业科学[J].2008，28（1）：25-29.

[2]张红梅，刘建东，王岩花，张利平.铁皮石斛茎段快繁技术研究.山西农业大学学报（自然科学版）[J].2010，30（6）：495-499.

[3]李霖明，刘霖贵，钟云芳.种有机添加物对铁皮石斛的组培苗壮苗阶段的生长影响.热带林业[J].201139（2）：38-40.

[4]李媛，朱丹红，潘会堂，张启翔.3种石斛兰以茎段为外植体的离体快繁技术.东北林业大学学报[J].2013，8（41）：77-81.