李秀琳，韩冲，唐玲荣，于洋洋，党军，李楠，李光

（中国医科大学附属第一医院放疗科，沈阳 110001）

·论著·

非小细胞肺癌hMOF蛋白表达与放疗预后的关系

李秀琳，韩冲，唐玲荣，于洋洋，党军，李楠，李光

（中国医科大学附属第一医院放疗科，沈阳 110001）

目的研究hMOF蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中表达情况及其与NSCLC放疗预后的相关关系。方法采用SP免疫组化方法分别检测59例接受放疗的NSCLC患者中hMOF蛋白表达情况，分析其与临床病理特征及NSCLC放疗预后的相关关系。结果59例NSCLC患者中hMOF蛋白高表达30例，高表达率50.85%。临床分期、hMOF蛋白表达水平是NSCLC放疗的独立预后因素。结论hMOF蛋白表达水平与NSCLC放疗预后相关，是影响NSCLC放疗预后的指标。

非小细胞肺癌；放疗预后；hMOF

放射治疗是晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）的主要治疗手段，但其5年生存率不足17%［1］。临床研究发现，多种因素影响NSCLC的放疗疗效和预后，深入了解NSCLC放疗预后影响因素，准确预测放疗疗效，对实现NSCLC个体化放疗及提高放疗疗效有极大帮助。研究［2～6］表明，人类MOF（human MOF，hMOF）蛋白在多种肿瘤组织中存在异常表达。本研究通过检测NSCLC病理标本中hMOF蛋白表达水平，探讨其与NSCLC放疗预后的相关关系，为NSCLC放疗预后提供预测指标。

1　材料与方法

1.1一般临床资料

收集2008年3月至2010年10月本院收治的初次行根治性放疗的NSCLC患者59例。其中男46例，女13例；年龄41～83岁（中位年龄61岁）；鳞癌23例，腺癌36例。参考2005年AJCC分期标准［7］：Ⅱ期17例，ⅢA期26例，ⅢB期16例。48例患者接受了依托泊苷联合顺铂或多西他赛联合顺铂方案同期化疗，其中25例患者接受了2个周期的同期化疗，23例患者接受了1个周期的同期化疗。

1.2放射治疗

所有患者均行根治性三维适形或调强放疗，患者在真空垫上仰卧，抽气真空定型，热塑体膜固定。进行C4～L2椎体下缘范围5 mm厚螺旋CT增强扫描，将扫描信息传至ADAC Pinnacle 9.0治疗计划系统，由2名临床医师依据扫描图像等资料确定大体肿瘤区（gross tumor volume，GTV），包括肺原发病灶、纵膈阳性淋巴结；GTV外扩0.5～0.7 cm为临床靶区（clinical target volume，CTV），不做纵膈淋巴引流区预防性照射；通过4D-CT或X线模拟定位机确定呼吸动度内靶区（internal target volume，ITV）为Z轴0.5～0.6 cm，其他方向0.2 cm；计划靶区（planning target volume，PTV）为ITV外扩0.5 cm。需要保护敏感器官（organ at risk，OAR）包括双肺、脊髓、食管、心脏等。计划评估：95%等剂量曲线包绕PTV，双肺V20≤30%、平均肺剂量（mean lung dose，MLD）≤15 Gy。直线加速器常规分割放疗，照射剂量达到40 Gy时再次行CT定位扫描，将图像与初治图像融合，根据瘤体变化情况更改肿瘤靶区，追加照射剂量，总剂量60～66 Gy，5次/周。

1.3免疫组织化学染色

病理组织标本均以10%甲醛固定，石蜡包埋封存，并经HE染色确诊。采用SP免疫组化方法分别检测59例NSCLC组织中hMOF表达情况。计数单位视野阳性细胞占总细胞的百分比，辅以计算机图像分析仪分析结果。染色判定标准：高倍镜下（× 400）随机选择5个视野，以肿瘤细胞核中出现棕黄色颗粒为阳性细胞。染色强度：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；染色数量：无阳性细胞为0分，阳性细胞簇＜10%为1分，10%～30%为2分，＞30%～50%为3分，＞50%～75%为4分。染色强度积分与数量积分相乘，得分0分定为阴性（-），1～4分为弱阳性（+），5～8分为阳性（++），9～12分为强阳性（+++）［8］。本研究中采用免疫组化评分≤4分（低表达）和＞4分（高表达）2组进行比较。

1.4统计学分析

采用统计学SPSS 19.0软件包进行数据处理。根据数据特征，免疫组化结果采用χ2检验进行计数资料差异性比较，生存率分析采用Kaplan-Meier法分析，不同变量的生存差异采用Log-rank检验，预后因素检验采用COX模型。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1NSCLC组织中hMOF蛋白表达情况（表1）

在59例接受根治性放疗的NSCLC组织中，hMOF蛋白高表达30例，高表达率为50.85%。hMOF蛋白高表达组与低表达组总体临床特征和治疗方案较均衡。

2.2hMOF蛋白表达水平与NSCLC放疗预后的相关关系

随访截止至2015年10月，59例中失访1例，随访率98.31%，失访病例自失访之日起按死亡计算。NSCLC患者放疗后1年、3年、5年总生存率分别为59.32%（35/59）、23.73%（14/59）、15.25%（9/59）。全组患者放疗后中位生存时间为15.0个月，hMOF蛋白高表达组中位生存时间为13.0个月，低于hMOF蛋白低表达组中位生存时间32.0个月，HR=8.056 （1.77～4.08），P=0.005。

NSCLC放疗预后单因素分析显示：临床分期、hMOF蛋白表达水平与NSCLC放疗预后相关；性别、年龄、吸烟情况、病理类型、放疗剂量、同期化疗与预后无相关关系，见表2。

表2　59例NSCLC Log-rank单因素预后分析Tab.2　The Log-rank univariate analysis of factors in 59 cases of non-small cell lung cancer

将单因素预后相关因素代入COX模型进行多因素分析显示：临床分期、hMOF蛋白表达水平是NSCLC放疗的独立预后因素。见表3，图1、2。

3　讨论

放射治疗在Ⅱ期、Ⅲ期NSCLC的综合治疗中占有非常重要的地位。近年来随着放疗技术的不断

提高和发展，接受放疗的肿瘤患者局部控制率明显提高，使部分患者生存获益，但局部晚期NSCLC患者的5年生存率仍不足17%［9］。临床研究［10，11］发现，肿瘤组织内某些蛋白表达水平影响NSCLC的放疗疗效和预后，深入了解NSCLC放疗预后影响因素，在放疗前对NSCLC患者的预后做出准确预测，对于实现NSCLC个体化、高效治疗具有重要意义。

表3　NSCLC患者放疗预后因素的相关性分析Tab.3　Analysis of re lationship of p rognostic factors in patients w ith non-sm all cell lung cancer afte r rad iotherapy

图1　不同临床分期患者放疗生存曲线Fig.1　Survival curves o f patients w ith different c linical stage after radiotherapy

图2　不同hMOF表达患者放疗生存曲线Fig.2　Survival curves of patients w ith different expression of hMOF after radiotherapy

hMOF蛋白是乙酰化酶（histoneacetyl-transferases，HATs）中MYST（Moz-Ybf2/Sas3-Sas2-Tip60）家族成员之一。hMOF蛋白可通过调节H4K16乙酰化水平来维持染色质结构和核结构的稳定，或通过ATM作用影响细胞对辐射所致的DNA损伤的修复能力［12］；也有研究［13］认为hMOF蛋白通过P53乙酰化参与DNA损伤修复及细胞凋亡的调控，来影响肿瘤细胞的放射敏感性。

文献报道［14］hMOF蛋白在新鲜冰冻NSCLC组织中阳性表达率为50.0%，而在石蜡切片中阳性表达率为37.6%，肺癌组织中hMOF mRNA水平较正常肺组织高8倍；另一项研究［2］发现，hMOF蛋白在NSCLC组织中阳性表达率32.6%，在正常组织中的阳性表达率2.3%。多篇文献［2，3，14］证实，在基因和蛋白水平上NSCLC肿瘤组织中hMOF表达明显高于癌旁正常组织。

本研究发现，在接受放疗的Ⅱ、Ⅲ期NSCLC中hMOF蛋白高表达组中位生存时间明显低于hMOF蛋白低表达组，hMOF蛋白高表达的NSCLC放疗后死亡风险是低表达的10.389倍，hMOF蛋白表达水平是NSCLC放疗的独立预后因素。Chen等［3］研究也发现NSCLC组织中hMOF蛋白表达升高，且hMOF蛋白高表达者手术后生存率低的结果。研究［15］发现经15 Gy照射后，hMOF蛋白表达上调的细胞中未修复的DNA断裂数目，较hMOF表达下调的细胞少，其放射敏感性低。但也有文献［16，17］报道，包括乳腺癌、结肠癌在内的多种肿瘤组织内hMOF蛋白表达水平均较正常组织显著降低，且在随访中发现hMOF蛋白低表达者手术后的生存率较高表达者低，与NSCLC迥然不同。由此可见，hMOF蛋白在不同肿瘤中表达情况不完全一致，与不同肿瘤的预后相关性也存在差异。本研究结果因例数相对较小，存在临床特征有差异或存在选择偏倚等，还需要进一步扩大样本量研究证实。

同类肿瘤不同个体之间对相同的治疗方案反应不同，其内在机制尚不清楚。hMOF蛋白表达有可能成为预测NSCLC放疗疗效的分子标记物，并通过调控hMOF蛋白表达水平，进而提高肿瘤细胞的放射敏感性，使hMOF成为提高放疗敏感性的作用靶点，为NSCLC治疗策略提供依据。

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（编辑于溪）

Correlation Study between hMOFExpression and Prognosisin Patientswith Non-smallCell Lung Cancer after Radiotherapy

LIXiu-lin，HANChong，TANGLing-rong，YUYang-yang，DANGJun，LINan，LIGuang
（DepartmentofRadiation Therapy，TheFirstHospital，ChinaMedicalUniversity，Shenyang 110001，China）

ObjectiveTo investigate the hMOF protein expression in non-small cell lung cancer and explore the relationship between its expression and radiotherapy prognosis.MethodsImmunohistochemical staining was used to detect the hMOF expression in 59 cases of non-small cell lung cancer after radiotherapy.The relationship between hMOF expression with clinicopathological and radiation prognosis was analyzed.Results Among the59 casesofnon-smallcelllungcancer tissues，therewere30 cases found tobehighexpressionwithhMOF.The rateofpositiveexpression of hMOF in non-small cell lung cancer were 50.85%.Clinical stage and hMOF expression were independent predictors for non-small cell lung cancer.ConclusionThe expression of hMOF had a positive correlation with the radiation prognosis in non-small cell lung cancer，which could be used asaprognostic indicatorofradiotherapy.

non-small cell lung cancer；radiotherapy prognosis；hMOF

R734.2

A

0258-4646（2016）04-0340-05

10.12007/j.issn.0258-4646.2016.04.013

沈阳市科技计划（F14-158-9-33）

李秀琳（1985-），女，医师，本科.

李光，E-mail：13804058616@163.com

2015-12-21

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