赵文静，张晶，修江帆

（贵州医科大学基础医学院，贵州贵阳550025）

德国小蠊核糖体相关膜蛋白的克隆和表达

赵文静，张晶，修江帆

（贵州医科大学基础医学院，贵州贵阳550025）

通过同源克隆获得德国小蠊RAM P的cDN A，并成功进行原核表达，使用生物信息学方法对其进行鉴定和分析。结果表明，德国小蠊RAM P的cDN A全长195bp，编码64个氨基酸，与诸多昆虫的RAM P具有较高的同源性，是碱性的小分子膜整合蛋白，单次跨膜，亲水性较高。该研究能够为德国小蠊RAM P的功能研究提供有价值的基础材料。

德国小蠊；核糖体相关膜蛋白；克隆；原核表达

德国小蠊（Blattellagermanica）是蜚蠊目昆虫中分布最为广泛的种类，与人类生活密切相关。其适应能力强，繁殖快，并具有迁徙、扩散的习性，已成为全球最普遍、最难治理的城市卫生害虫［1］。

核糖体相关膜蛋白（Ribosome-associated Membr ane Protein，RAMP），又称压力相关内质网蛋白（Stressassociated Endoplasmic Reticulum Protein，SERP），是一类与应激相关的蛋白。Yamaguchi等［2］使用缺氧大鼠模型，获得大鼠RAMP的cDNA，并验证在缺氧条件下，大鼠通过过表达RAMP以抑制其他膜蛋白的合成。而当环境压力（缺氧）解除后，该蛋白能够促进新合成蛋白的谷氨酸化。现今，多种昆虫RAMP的cDNA和EST已经获得并上传至NCBI，但与昆虫相关的研究文献较少，仅查阅到2005年Yao等［3］克隆并鉴定家蚕的RAMP蛋白。鉴于此，该研究克隆并表达德国小蠊RAMP蛋白，使用分子生物学方法对其进行鉴定和分析，为进一步研究该蛋白的功能奠定基础。

1 实验部分

1.1 材料

德国小蠊敏感系引种于中国科学院昆明动物研究所，繁殖并饲养于贵州医科大学生物学教研室蜚蠊目养殖室。……