王晓彤，冉小库，徐煜彬， ，薛凡亲，窦德强*，董锋

(1.辽宁中医药大学，辽宁 大连 116600；2.珍奥集团股份有限公司，辽宁 大连 116600)

·基础研究·

亚贡叶化学成分的分离与鉴定△

王晓彤1，冉小库1，徐煜彬1，KhinKhinWinAung1，薛凡亲1，窦德强1*，董锋2

(1.辽宁中医药大学，辽宁 大连116600；2.珍奥集团股份有限公司，辽宁 大连116600)

目的：对亚贡叶的化学成分进行研究。方法：采用硅胶、ODS和LH-20等柱色谱以及半制备HPLC对亚贡叶的乙醇提取物进行分离纯化。结果：分离得到4个化合物，经谱学数据鉴定为亚麻酸甲酯[(9Z，12Z，15Z)-methyloctadeca-9，12，15-trienoate，1)，邻苯二甲酸二丁酯(dibutylphthalate，2)，沼菊素(Enhydrin，3)和PolymatinB(4)。结论：化合物1和2为首次从亚贡叶中分离得到。

亚贡叶；亚麻酸甲酯；邻苯二甲酸二丁酯；沼菊素

亚贡Smallanthussonchifolius为菊科(Compositae)菊薯属(Smallanthus)多年生草本植物[1]。研究表明亚贡叶具有降血糖、降血压、抗氧化、抑菌等作用，对高血压、动脉粥样硬化、消化道和循环系统疾病以及结肠癌都有一定的治疗作用[2-6]。亚贡已经引种到我国海南、台湾、云南、江苏、辽宁等地，并在多地已经形成了大规模的种植基地，在商场目前已有亚贡根茎作为食品销售，而亚贡叶往往作为废弃物被丢弃在田间，因此为了亚贡叶的广泛利用，我们对亚贡叶进行了化学成分的研究，从亚贡叶的乙醇提取物中，利用硅胶、ODS和LH-20等柱色谱以及半制备HPLC等方法，分离得到4个化合物。通过1H-和13C-NMR，GC-MS等谱学数据和文献对照分析，确定这些化合物分别是亚麻酸甲酯[(9Z，12Z，15Z)-methyloctadeca-9，12，15-trienoate，1]，邻苯二甲酸二丁酯(dibutylphthalate，2)，沼菊素(enhydrin，3)和polymatin B(4)，其中化合物1和2为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

BRUKER-ARX-500核磁共振波谱仪(德国)；ODS(富吉，日本)；Agilent1260高效液相色谱系统(配有DAD检测器、在线脱气机、自动进样器，美国安捷伦Agilent科技公司)；890/5975C气相色谱/质谱联用仪(美国Agilent公司)，HITACHI7100制备型高效液相色谱仪(日本)；YMC-PackODS-A色谱柱(250mm×10mm，5μm，日本)；柱色谱及TLC所用硅胶(青岛海洋化工厂)；FA-1004电子天平(上海精科天平厂)；液相用甲醇为色谱纯(天津市大茂化学试剂厂)。其他试剂均为分析纯。

亚贡叶于2012年采自辽宁省大连市开发区得胜镇，经辽宁中医药大学药学院康廷国教授鉴定为菊科植物亚贡Smallanthussonchifolius的叶。

2 提取与分离

取干燥的亚贡叶(5.0kg)，粉碎成粗粉，以10倍量95%乙醇浸泡2h，60℃水浴回流提取，过滤，药渣继续加乙醇10倍量提取，过滤，合并两次滤液，回收乙醇，旋转蒸发仪悬至近干，置真空干燥箱干燥。

取上述所得干燥浸膏，加甲醇溶解，以100～200目硅胶拌样，以200～300目硅胶柱分离，以二氯甲烷-甲醇梯度洗脱，得到6个馏分，将第1个和第2个馏分分别通过ODS和LH-20柱色谱以及半制备HPLC，最终从第1个馏分中分离并鉴定得到化合物1，从第2个馏分分离并鉴定得到化合物2～4。

3 结构鉴定

化合物1：无色油状液体。13C-NMR(CDCl3，125MHz)：δ174.3(C-1)，δ132.0(C-16)，δ130.3(C-9)，δ128.3(C-11)，δ128.3(C-12)，δ127.8(C-14)，δ127.1(C-10)，δ51.4(OCH3)，δ34.1(C-2)，δ29.6(C-7)，δ29.1(C-6)，δ29.1(C-5)，δ29.1(C-4)，δ27.2(C-8)，δ25.6(C-11)，δ25.5(C-14)，δ24.9(C-3)，δ20.6(C-17)，δ14.3(C-18)；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)：δ5.31(6H，m，H-9，10，12，13，15，16)，δ3.67(3H，s，OCH3)，δ2.04(4H，t，5.4Hz，H-8，H-17)，δ1.6(2H，m，H-3)，δ1.28～1.31(8H，brs，H-4，5，6，7)，δ0.97(3H，t，J=7.5 Hz，H-18；GC-MS，m/z292.3[M]+，277.1[C18H29O2]+，261.1，236.2，223.2，204.1，191.2，177.2，163.1，149.1，135.1，121.1，108.1，95.1，79.1，55.1，41.1，27.1。通过GC-MS数据库匹配结果以及谱学数据与文献对照基本一致，确定化合物1为(9Z，12Z，15Z)-methyloctadeca-9，12，15-trienoate(亚麻酸甲酯)[7]。化学结构见图1。

化合物2：白色粉末。13C-NMR(CDCl3，125 MHz)：δ167.8(C-1)，δ132.3(C-2)，δ130.9(C-3)，δ128.9(C-4)，δ65.6(C-1′)，δ30.6(C-2′)，δ19.2(C-3′)，δ13.7(C-4′)；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)：δ7.74(2H，d，5.5Hz，H-3)，δ7.55(2H，d，5.5Hz，H-4)，δ4.32(4H，t，6.72Hz，H-1′)，δ1.74(4H，m，6.84 Hz，H-2′)，δ1.47(4H，m，7.44 Hz，H-3′)，δ0.99(6H，t，7.44 Hz，H-4’)。经文献检索发现，该化合物碳谱与氢谱数据与文献基本一致[8]，该化合物高度对称，因此碳数目为碳谱给出数据的2倍，确定化合物邻苯二甲酸二丁酯。化学结构见图1。

化合物3：白色无定形粉末。13C-NMR(CDCl3，125 MHz)：δ149.5(C-1)，δ24.7(C-2)，δ35.4(C-3)，δ59.3(C-4)，δ62.8(C-5)，δ76.0(C-6)，δ60.0(C-7)，δ71.3(C-8)，δ70.4(C-9)，δ130.1(C-10)，δ133.4(C-11)，δ168.0(C-12)，δ123.0(C-13)，δ165.5(C-14)，δ17.5(C-15)，δ168.4(C-1′)，δ59.4(C-2′)，δ45.5(C-3′)，δ13.6(C-4′)，δ19.1(C-5′)，δ170.4(Ac)，δ20.9(-COCH3)，δ52.6(-OCH3)。将该化合物谱学数据与文献对照[9]，鉴定该化合物为已知化合物沼菊素(enhydrin)。化学结构见图1。

化合物4：白色粉末。13C-NMR(CDCl3，125 MHz)：δ148.2(C-1)，δ26.1(C-2)，δ37.0(C-3)，δ138.6(C-4)，δ126.3(C-5)，δ75.5(C-6)，δ51.1(C-7)，δ69.2(C-8)，δ71.3(C-9)，δ130.7(C-10)，δ134.6(C-11)，δ169.4(C-12)，δ121.7(C-13)，δ166.0(C-14)，δ17.0(C-15)，δ170.1(C-OAc)，δ20.8(-COCH3)，δ166.3(C-1′)，δ126.9(C-2′)，δ139.4(C-3′)，δ15.7(C-4′)，δ20.4(C-5′)，δ52.3(-OCH3)。经文献检索，发现该化合物碳谱数据与文献基本一致[10]，因此确定该化合物为polymatin B。化学结构见图1。

注：1.亚麻酸甲酯;2.邻苯二甲酸二丁酯;3.沼菊素;4.polymatin B图1 化合物1～4的化学结构

[1] Valentová K，Frcek J，Ulrichová J.Yacon (Smallanthussonchifolius) and maca (Lepidiummeyenii)，traditional andean crops as new functional foods on the european market[J].Feedback，1997，91：594.

[2] 金文闻，余龙江，孟思进，等.亚贡的植物学及其药理作用研究概况[J].中草药，2006，37(4)：633-636.

[3] Habib N C，Honoré S M，Genta S B，et al.Hypolipidemic effect ofSmallanthussonchifolius(yacon) roots on diabetic rats：Biochemical approach[J].Chem-Biol Interactions，2011，194(1)：31-39.

[4] Oliveira G O，Braga C P，Fernandes AAH.Improvement of biochemical parameters in type 1 diabetic rats after the roots aqueous extract of yacon[Smallanthussonchifolius(Poepp.& Endl.)] treatment[J].Food Chem Toxicol，2013，59：256-260.

[5] Dwivedi S，Sahrawat K，Puppala N，et al.Plant prebiotics and human health：Biotechnology to breed prebiotic-rich nutritious food crops[J].Electronic J Biotechnol，2014，17(5)：238-245.

[6] Satoh H，Kudoh A，Hasegawa K，et al.Yacon supplementation reduces serum free fatty acids and tumor necrosis factor alpha concentrations in patients with type 2 diabetes[J].Diabetol Int，2014，5(3)：165-174.

[7] 曾浩洋，阿布拉江·克依木，刘艳，等.宽裂龙蒿地上部分化学成分研究[J].中草药，2013，44(9)：1096-1100.

[8] 蓝鸣生，罗超，谭昌恒，等.山风乙酸乙酯部位的化学成分研究[J].中药材，2012，35(2)：229-231.

[9] Tak H，Fronczek F R，Vargas D，et al.Assignments of the13C-NMR spectra of enhydrin and 2′，3′-dehydromelnerin A and the molecular structure of enhydrin[J].Spectrosc Lett，1994，27(10)：1481-1488.

[10] Inoue A，Tamogami S，Kato H，et al.Antifungal melampolides from leaf extracts of Smallanthus sonchifolius[J].Phytochemistry，1995，39(4)：845-848.

PhytochemicalStudyonSmallanthussonchifoliusLeaves

WANGXiaotong1，RANXiaoku1，XUYubin1，KhinKhinWinAung1，XUEFanqin1，DOUDeqiang1*，DONGFeng2

(1.LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Dalian116600，China；2.Zhen’aoGroupLimitedbyShareLtd，Dalian116600，China)

Objective：To study the chemical constituents ofSmallanthussonchifoliusleaves.Methods：Silica gel，ODS and Sephadex LH-20 column chromatographies and semipreparative HPLC were used to separate and purify the ethanol extract of the leaves.Results：Four compounds were obtained and identified as (9Z，12Z，15Z)-methyloctadeca-9，12，15-trienoate (1)，dibutylphthalate (2)，enhydrin (3) and polymatin B (4).Conclusion：Compounds1and2were isolated fromS.sonchifoliusleaves for the first time.

Smallanthussonchifolius；(9Z，12Z，15Z)-methyloctadeca-9，12，15-trienoate；dibutylphthalate；enhydrin

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.9.006

2015-12-10)

辽宁省高等学校创新团队课题(LT2013020)；辽宁省教育厅一般项目(L2013364)；辽宁中医药大学2015年度大学生创新创业训练计划(201510162000057)

*

窦德强，教授，博士，研究方向：天然药物的研究与开发；Tel：(0411)85890143，E-mail：deqiangdou@126.com