林豪雨，郭昱显，林芳芳，孙淑明，卢晓峰，梁伟全，陈春发

（1.汕头大学医学院第一附属医院甲状腺乳腺外科，2.汕头大学医学院长江学者实验室　广东　汕头　515041）

GATA-3启动子报告基因载体构建及其活性鉴定

林豪雨1，2，郭昱显2，林芳芳2，孙淑明1，卢晓峰1，梁伟全1，陈春发1

（1.汕头大学医学院第一附属医院甲状腺乳腺外科，2.汕头大学医学院长江学者实验室广东汕头515041）

目的转录因子GATA-3在人乳腺癌的发生发展中扮演重要的角色，研究其转录调控有重要意义.方法从人乳腺癌细胞系MCF-7提取基因组DNA为模板，以PCR方法扩增获得GATA-3启动子序列，将片段克隆到pGL3-Basic载体内，鉴定后通过报告基因检测系统检测GATA-3启动子报告基因的荧光素酶活性.结果双酶切、基因测序鉴定结果显示，成功构建了GATA-3启动子报告基因，并在MCF-7细胞内鉴定了其具有荧光素酶的表达活性.结论本实验成功构建了GATA-3启动子报告基因载体pGL3-GATA-3pro-Luc，为后续GATA-3在乳腺癌中表达及其调控通路以及以GATA-3为靶标的抗肿瘤药物研究提供了有效工具.

乳腺肿瘤；GATA-3；启动子；报告基因

GATA-3属于GATA转录因子家族，是乳腺腔上皮细胞的重要标志，在乳腺腔上皮细胞发生及维持分化有重要作用［1］.GATA-3与ERa同时高表达于luminal型乳腺癌细胞（如MCF-7、T47D），具有高度相关性，GATA-3对ER有调控作用，可能是ER通路的重要组成部分［2］.多个研究表明GATA-3在乳腺癌的发生发展中扮演重要的角色，是乳腺癌良好预后的指标，可以通过逆转EMT、改变肿瘤的微环境，抑制新生血管形成，负性调控多个癌基因等抑……