邹亚娟,代博娜

(上海交通大学 分析测试中心，上海　200240)



研究报告(069～073)

基于NMR技术的溶菌酶在琼脂糖凝胶中的动力学研究

邹亚娟,代博娜

(上海交通大学 分析测试中心，上海200240)

运用脉冲梯度场测量自扩散系数及自旋自旋弛豫时间测量核磁共振技术对鸡蛋清溶菌酶(HEWL)在琼脂糖凝胶中的动力学进行了研究.试验结果表明，HEWL在琼脂糖凝胶中的自扩散系数及自旋自旋弛豫时间较其在纯乙酸钠溶液中变小，说明琼脂糖凝胶的三维网状结构使HEWL分子整体运动及局部运动都受到阻碍. 并且随着琼脂糖浓度的增大，凝胶网孔尺寸不断减小，HEWL分子运动受限程度加剧，从而蛋白质分子可以较长时间内停留在高浓度区，分子间更容易互相碰撞，发生反应，晶核生长得以促进. 同时琼脂糖凝胶较小流体力学网孔尺寸抑制聚晶或沉淀的出现，晶体质量获得提高.

琼脂糖凝胶；核磁共振；溶菌酶；蛋白质结晶

溶菌酶又称胞壁质酶，是由129个氨基酸组成的一种无毒且具有一定溶菌作用的碱性球蛋白，可溶于水和酸性溶液，耐热, 在pH 4～7的范围内, 100 ℃处理1 min仍有近100%的活力，在食品、医学、生物工程等多种领域中用途非常广泛，目前实际应用和已商品化的是鸡蛋清溶菌酶(HEWL)[1-4]. 在结晶蛋白中，溶菌酶是一种模型蛋白，1946年，四方晶系蛋清溶菌酶单晶首次由Alderton获得，随后其结晶条件被继续深入研究. 到20世纪80年代初时，人们已经对溶菌酶结晶与温度、pH值、NaCl浓度等反应条件之间的关系有了……