王晓东，康巧珍，王小龙，李树芳，王　婷，刘　鑫#,汲振余

1)郑州大学生命科学学院分子免疫学实验室 郑州 450001　2)河南省医药科学研究院 郑州 450052



HP-NAP对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用*

王晓东1)，康巧珍1)，王小龙1)，李树芳1)，王婷1)，刘鑫1)#,汲振余2)#

1)郑州大学生命科学学院分子免疫学实验室 郑州 4500012)河南省医药科学研究院 郑州 450052

幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白；肝癌；H22细胞；IFN-γ；小鼠

目的：研究幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长抑制作用及可能机制。方法：构建pET28a-NAP重组质粒，转入E.coliBL21(DE3)菌株，IPTG诱导HP-NAP的表达，Ni柱亲和层析法对其进行分离纯化。取BALB/c小鼠,皮下注射H22细胞(2×106个/只)构建荷瘤模型，随机分为PBS组和HP-NAP组，以皮下瘤旁注射的方式给予PBS或HP-NAP，监测肿瘤体积和小鼠体重变化。1周后牺牲小鼠，取瘤体及各脏器称重，以ELISA法检测脾细胞IFN-γ分泌水平，实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中IFN-γ mRNA的表达水平。结果：利用大肠杆菌原核表达系统成功制备了HP-NAP。HP-NAP可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长，对小鼠体重和脏器指数无明显影响。与PBS组相比，HP-NAP组小鼠脾细胞IFN-γ的分泌水平及肿瘤组织中IFN-γ mRNA的表达水平均升高(P<0.05)。结论：HP-NAP可能通过上调IFN-γ的表达抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长。

Toll样受体 (Toll like receptor,TLR)激动剂的抗肿瘤作用及机制已成为肿瘤治疗研究的一个重要方向[1]。已有部分TLR激动剂如卡介苗、单磷酰脂质A与CpG被FDA批准为抗肿瘤临床用药或已进入临床试验阶段[2-4]。幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(Helicobacterpylorineutrophil-activating protein，HP-NAP)是幽门螺杆菌侵染胃黏膜时释放的重要的毒力因子[5]，被证实是有效的TLR2激动剂。研究[6-7]证实，HP-NAP可通过上调Th1型免疫反应抑制膀胱癌的生长。……