韩晓燕，包郁明，辛凤姣，孔志强，Christophe Blecker，戴小枫

（1中国农业科学院农产品加工研究所/农业部农产品加工重点实验室，中国北京 100193；2烈日大学食品学院，比利时）

棉籽蛋白酶解物的制备及其抗菌活性

韩晓燕1，包郁明1，辛凤姣1，孔志强1，Christophe Blecker2，戴小枫1

（1中国农业科学院农产品加工研究所/农业部农产品加工重点实验室，中国北京 100193；2烈日大学食品学院，比利时）

【目的】通过体外模拟动物胃肠道消化环境，对两种棉籽蛋白的酶解产物抗菌活性进行研究，为棉籽蛋白精深加工、高值化利用提供理论依据。【方法】以棉籽粕为原料，用Osborne法和传统的碱溶酸沉法分别制备棉籽蛋白（清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白及谷蛋白）和棉籽分离蛋白（cottonseed protein isolate，CPI），用凯氏定氮法测定所得棉籽蛋白的蛋白含量，Tricine-SDS-PAGE测定蛋白亚基组成，通过扫描电镜观察蛋白的表面微观结构，选取蛋白含量较高的球蛋白（cottonseed globulin，CPG）和CPI进行研究。通过体外模拟动物胃肠道消化环境，用胃蛋白酶和胰蛋白酶依次对CPG和CPI进行酶解；以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为受试菌，分别以抗生素卡那霉素（Kanamycin，Kan）及未经酶解的蛋白溶液为对照，研究棉籽蛋白酶解产物的抗菌活性，同时用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）检测酶解产物中小肽的分子量大小及分布。【结果】碱溶酸沉法的提取率为（70.52±2.40）%，所得CPI的蛋白含量为（89.53±0.66）%；用Osborne法分别得到清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白等4种棉籽蛋白，提取率为（67.55±1.16）%，其中CPG的蛋白含量最高为（82.57±1.02）%。Tricine-SDS-PAGE图谱表明CPG的亚基组成与CPI较接近；扫描电镜观察到的蛋白表面微观结构差别较大，CPI为颗粒大小较均匀整齐的蜂窝状结构，CPG由大小不均一的蛋白颗粒构成；……