刘　玉，陈文琦，王　平，操　敏，韩一芳，张　琪，张锦海，王长军



·论著·

炭疽杆菌双重可视化LAMP检测方法的建立

刘玉1，陈文琦2，王平1，操敏1，韩一芳1，张琪1，张锦海1，王长军1

目的建立同时检测炭疽杆菌capA基因、PA基因的双重环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法，用于防范生物恐怖威胁。方法设计和合成分别针对炭疽杆菌capA基因、PA基因的引物对，通过优化参数，建立可同时检测capA基因、PA基因的双重LAMP方法，测试敏感性和特异性，并应用于模拟样本和实战检测。结果双重LAMP的检测capA基因、PA基因的敏感性均可达到50模板拷贝每反应，并具有良好的特异性，在重大保障活动中得到检验。结论双重LAMP方法具有可以同时筛查、简单快速、灵敏度高等优点，在炭疽杆菌检测方面有良好应用前景。

炭疽杆菌；环介导等温扩增；检测

炭疽杆菌是人畜共患致病菌，具有高度致病性，其芽胞可存活十年以上，可形成气溶胶，且除易引发突发公共卫生事件外，还被认为是最有效的生物武器之一，以及最可能被用于制造生物恐怖的主要病原之一[1]。

目前的炭疽检测方法还面临两个关键问题：一是如何在条件较简陋的事发现场快速确定是否存在炭疽杆菌；二是如何快速鉴定出炭疽强毒株，以挽救吸入性感染炭疽强毒株的病人生命，同时确定针对目标人群的强制性隔离防疫措施等。炭疽杆菌与枯草芽胞杆菌等其它蜡样菌群的序列有很高的同源性，但重要区别在于它有2个与毒力密切相关的特异性质粒(pX01和pX02)。pX01质粒上包含分别编码保护性抗原PA、致死因子、水肿因子的基因，为炭疽杆菌侵袭及毒力所必需；……