王 云张 文杨绍兴刘滨磊*张开泰*

（中国医学科学院1北京协和医学院肿瘤医院病因及癌变研究室，2中国医学科学院肿瘤医院免疫学研究室；3中国人民解放军第307医院肺部肿瘤内科；北京 100021）



oHSV1-hTERT-GFP法检测小细胞肺癌循环肿瘤细胞

王 云1张 文2杨绍兴3刘滨磊2*张开泰1*

（中国医学科学院1北京协和医学院肿瘤医院病因及癌变研究室，
2中国医学科学院肿瘤医院免疫学研究室；3中国人民解放军第307医院肺部肿瘤内科；北京 100021）

目的 在正常人体细胞中活性被抑制的端粒酶，在肿瘤细胞中处于活化状态，可以特异性示踪循环肿瘤细胞。本研究拟建立基于插入人端粒酶启动子和绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）基因的单纯疱疹病毒（oHSV1-hTERTGFP）检测小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）外周血中循环肿瘤细胞的方法。方法 观察SCLC细胞在感染病毒oHSV1-hTERT-GFP后的荧光强度来判断GFP的表达，通过建立SCLC循环肿瘤细胞模型，用oHSV1-hTERT-GF法检测CD45-/ GFP+细胞，分析此法对SCLC细胞的捕获效率和可重复性；通过CD56与GFP进行共定位来验证oHSV1-hTERT-GFP对SCLC细胞示踪的特异性；应用oHSV1-hTERT-GFP法检测50例正常人和10例广泛期SCLC病人治疗前后的外周血中CD45-/GFP+细胞数，分析此法检测正常人与SCLC病人CD45-/GFP+细胞数的差异和SCLC病人治疗前后CD45-/GFP+细胞数变化，并将oHSV1-hTERT-GFP法检测的循环肿瘤细胞数量变化与临床疗效进行对比分析。结果 感染病毒oHSV1-hTERT-GFP后24h的SCLC细胞GFP表达量较感染后16h显著增加；模型实验结果显示oHSV1-hTERT-GFP法检测循环肿瘤细胞的效率与其在外周血中的含量无关；oHSV1-hTERT-GFP病毒捕获的细胞与CD56共定位，oHSV1-hTERT-GFP捕获SCLC细胞的特异性高。临床实验中，SCLC病人外周血中的CD45-/GFP+细胞数比健康人显著增加；……