AG490在人膀胱癌细胞株 Pumc-91中STAT3的抑制作用
2016-09-15周商言
周商言,张 曼
(首都医科大学附属北京世纪坛医院医学检验科,尿液细胞分子诊断北京市重点实验室,北京 100038)
AG490在人膀胱癌细胞株Pumc-91中STAT3的抑制作用
周商言,张 曼
(首都医科大学附属北京世纪坛医院医学检验科,尿液细胞分子诊断北京市重点实验室,北京100038)
目的 研究不同孵育时间以及不同浓度的STAT3特异性抑制剂AG490作用于人移形上皮膀胱癌细胞株(pumc-91)中STAT3信号通路蛋白表达的条件优化。方法 分别在0、24、36、48、60h收集细胞并提取细胞蛋白,应用Western Blot对各组中STAT3的蛋白表达水平进行半定量分析;加入100μmol/L AG490作用于pumc-91细胞,分别用0、50、100、200μmol/L的AG490处理pumc-91细胞48h后,应用Western Blot检测各组中STAT3的蛋白表达水平。结果 STAT3蛋白的表达随AG490作用时间延长而逐步降低,在作用时间为48h时,差异有统计学意义(P<0.05)。STAT3蛋白的表达明显随AG490浓度的升高而逐步下降,在浓度为200μmol/L时差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 AG490通过抑制STAT3蛋白的表达,成功抑制了STAT3信号通路的活性,而且其抑制作用具有时间和剂量的依赖性,AG490在作用浓度为200μmol/L和作用时间为48h的条件下,有效的抑制了STAT3蛋白在pumc-91细胞系中的表达。
膀胱癌; STAT3; AG490; 蛋白免疫印迹
DOI:10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.04.028
收稿日期:2016-01-26;修回日期:2016-02-02
基金项目:尿液细胞分子诊断北京市重点实验室(Z151100001615060);北京市中医药管理局(2014-ZYJ04)
作者简介:周商言(1986—),女,硕士在读,主要从事蛋白质组学研究。
通讯作者:张曼,教授,博士生导师。E-mail:mzhang99@aliyun.com
信号传导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)是一种存在于胞质中的转录因子,当细胞因子或生长因子激活其上游JAK2激酶后,使STAT3分子酪氨酸磷酸化,磷酸化的STAT3以二聚体形式转移至胞核调节靶基因的转录。……
