张素真，赵旭辉，孙春秀，李书君

（邢台市人民医院，1.检验科，2.神经外科，河北　邢台　054031）

ProGRP与NSE及其联合应用在小细胞肺癌诊断中的意义

张素真1，赵旭辉2，孙春秀1，李书君1

（邢台市人民医院，1.检验科，2.神经外科，河北邢台054031）

目的 探讨proGRP与NSE及其联合应用在小细胞肺癌诊断中的意义。方法 回顾性分析2014年5月至2015年1月在我院经病理明确诊断的小细胞肺癌（小细胞肺癌组）、非小细胞肺癌（非小细胞肺癌组）、肺部良性疾病（肺部良性疾病组）患者，及健康体检者的proGRP与NSE水平。比较各组不同性别和不同年龄者proGRP与NSE的阳性率，并对其进行统计分析；绘制proGRP和NSE及其联合检测在小细胞肺癌诊断中的ROC曲线，并计算曲线下面积。结果 各组内proGRP与NSE阳性率的性别和年龄的差异无统计学意义（P＞0.01）；小细胞肺癌组proGRP阳性率高于其余各组（P＜0.01）；小细胞肺癌组和非小细胞肺癌组NSE阳性率的差异无统计学意义（P＞0.01）；小细胞肺癌无论是局限期还是广泛期proGRP与NSE水平均高于其余各组（P＜0.01）。结论 proGRP和NSE均可用于小细胞肺癌的诊断，且proGRP要优于NSE。两者水平的高低还可用于小细胞肺癌的临床分期。proGRP与NSE联合检测可以提高小细胞肺癌的诊断效能。

小细胞肺癌； 非小细胞肺癌； 胃泌素释放肽前体； 神经元特异性烯醇化酶； 电化学发光

DOI：10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.04.015

收稿日期：2016-01-15；修回日期：2016-02-22

通讯作者：张素真。E-mail：susensun@sohu.com

随着吸烟人群的增多和城市工业化造成的空气与环境指标的日趋下降，使肺癌的发病率与死亡率逐年上升，位于全球恶性肿瘤发病率与死亡率之首［1］。肺癌分为小细胞肺癌（SCLC）和非小细胞肺癌（NSCLC），SCLC又可分为：单纯性小细胞肺癌、混合性癌（即小细胞癌与鳞或腺癌的混合型）［2］。虽然SCLC仅占肺癌的15%～20%，但SCLS却是一种恶性程度更高、病因更为复杂的肿瘤，具有快速和侵袭性生长的特点，易发生广泛性坏死和淋巴结转移。电子计算机断层扫描（CT）可以筛查发现早期NSCLC，但是对筛查SCLC并不理想。因为影像学手段很难发现小的、散在肿瘤病灶上的SCLC。活检虽然可以对SCLC和NSCLC进行确诊，但并非所有的患者都可以进行活检，即使可以进行活检，很多病例也取不到最终的恶性组织［3］。肿瘤标志物检测作为组织病理学和影像学检查的有力补充，能为肺癌患者的诊断与鉴别诊断提供重要的参考价值［4］。美国临床生物化学学会（NACB）在《肺癌标志物临床指南》中推荐胃泌素释放肽前体（proGRP）用于SCLC鉴别诊断、SCLC术后监测、晚期SCLC化疗的监测和早期复发的监测。《中国原发性肺癌诊疗规范（2011年版）》在影像学检查和组织病理学检查的基础上，增加了肺癌相关标志物的检测。本文通过对2014年5月至2015年1月在邢台市人民医院住院治疗的肺癌患者血清proGRP与NSE的检测，探讨proGRP与NSE及其联合应用在小细胞肺癌诊断中的意义。

材料和方法

1 材料

1.1标本来源 回顾性分析2014年5月至2015年1月期间在邢台市人民医院住院的具有明确病理诊断的肺癌患者252例，其中小细胞肺癌48例（男性30例，女性18例；年龄分布为32～75岁，其中32～50岁13例，51～75岁35例），非小细胞肺癌204例（男性129例，女性75例；年龄分布为31～72岁，其中31～50岁69例，51～72岁135例）；患有肺部良性疾病的患者65例（男性33例，女性32例；年龄分布为30～68岁，其中30～50岁33例，51～68 岁32例），其中包括肺炎患者55例（男性31例，女性24例；年龄分布为32～65岁，其中32～50岁29例，51～65岁26例），其他肺病患者10例（其中男性2例，女性8例；年龄分布为30～68岁，其中30～50岁4例，51～65岁6例）；健康体检人群138例（男性86例，女性52例；年龄分布为30～71岁，其中30～50岁88例，51～65岁50例）为正常对照组。

1.2样本处理 空腹采集促凝血2.5 mL，3500r/min离心10 min，备用。

2 方法

2.1病例资料的临床分期 依据美国退伍军人医院肺癌研究小组制定的SCLC分期系统对小细胞肺癌进行分期，其中局限期病例17例，广泛期病例31例；依据TNM分期对非小细胞肺癌进行分期，其中原位期20例，早期29例，中期102例，肺癌中晚期42例，肺癌晚期11例。

2.2proGRP与NSE的测定 罗氏Cobas e601电化学发光分析仪及其公司提供的配套proGRP与NSE测定试剂盒、校准品和质控品。由专业人员在仪器状态稳定条件下严格遵守实验室仪器与项目操作规程进行操作，定标通过后，将proGRP与NSE高、低两个水平的质控品与当天标本进行上机检测，实验结束后首先分析质控是否有效，如质控有效则检测结果可用，如质控无效则查找原因，排除无效的原因后对当天标本重新进行检测。其中proGRP的cut off值69.2pg/mL，NSE的cut off值为16.3ng/mL。

2.3绘制ROC曲线 通过绘制proGRP和NSE及其联合检测在小细胞肺癌诊断中的ROC （receiver operating characteristic curve）曲线，并计算曲线下面积（AUC：area under curve），以判断proGRP与NSE及其联合检测在小细胞肺癌诊断中价值。

3 统计学处理

采用spss 17.0软件分别对各组数据进行统计学分析，统计各实验组不同性别和不同年龄人群proGRP与NSE阳性率，率的比较用卡方检验（以P＜0.01表示差异具有统计学意义）。统计各实验组proGRP与NSE的中位数和四分位数。先对多组资料做 Kruskal-Walls检验（以P＜0.05表示差异具有统计学意义），再做两两组之间的Mann-Whitney U检验（以P＜0.01表示差异具有统计学意义）。

结 果

1 各实验组不同性别和不同年龄人群proGRP 与NSE的阳性率

各组内proGRP与NSE阳性率的性别和年龄的差异无统计学意义（P＞0.01）；肺良性疾病组和正常对照组间proGRP与NSE阳性率的差异无统计学意义（P＞0.01）；非小细胞肺癌组和肺良性疾病组、正常对照组间proGRP阳性率的差异无统计学意义（P＞0.01）；非小细胞肺癌组和肺良性疾病组、正常对照组间NSE阳性率的差异有统计学意义（P＜0.01）；小细胞肺癌组与其他各组间proGRP阳性率的差别均有统计学意义（P＜0.01）；小细胞肺癌组和正常对照组、肺良性疾病组间NSE阳性率的差异有统计学意义；小细胞肺癌组和非小细胞肺癌组NSE阳性率的差异无统计学意义（P＞0.01）。

表1　各实验组不同性别人群proGRP与　NSE的阳性率

表2　各实验组不同年龄人群　proGRP与　NSE的阳性率

2 各实验组proGRP与NSE的血清水平

肺良性疾病组与正常对照组间proGRP和NSE水平的差别均无统计学意义（P＞0.01）；非小细胞肺癌组与正常对照组、肺良性疾病组间proGRP水平的差别无统计学意义（P＞0.01），非小细胞肺癌组与正常对照组、肺良性疾病组间NSE水平的差别有统计学意义（P＜0.01）；小细胞肺癌组无论是局限期还是广泛期和正常对照组、肺良性疾病组、非小细胞肺癌组间proGRP与NSE水平的差别均有统计学意义（P＜0.01）；小细胞肺癌组局限期和广泛期proGRP与NSE水平的差别有统计学意义（P＜0.01）。

表3　各实验组血清　proGRP与　NSE水平的中位数和四分位数

3 绘制proGRP和NSE及其联合检测在小细胞肺癌诊断中的ROC曲线

在小细胞肺癌的诊断中proGRP和NSE联合检测曲线下的面积0.980（P＜0.05）＞proGRP曲线下的面积0.953（P＜0.05）＞NSE曲线下的面积0.864 （P＜0.05）。

讨 论

本研究检测了正常对照组、肺良性疾病组、非小细胞肺癌组和小细胞肺癌组（包括局限期和广泛期）人群血清proGRP和NSE的水平，分性别和年龄比较了这两个指标在不同组别的阳性率，同时比较了proGRP和NSE在各组间的水平差异，并且绘制proGRP和NSE及其联合检测的ROC曲线并得到了曲线下面积，以便探讨proGRP和NSE及其联合检测在小细胞肺癌诊断中的意义。

目前，临床常用的肺癌肿瘤标志物包括：癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19的可溶性片段（CYFRA21-1）、鳞状上皮细胞癌抗原（SCC）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和胃泌素释放肽前体（proGRP）。其中，CEA主要应用于腺癌和大细胞癌，CYERA21-1主要用于腺癌和鳞癌，SCC主要用于鳞癌，而 NSE和proGRP则是用于SCLC的特异性标志物［5］。

烯醇化酶是一种哺乳动物组织中普遍存在的糖酵解酶，NSE为其中同工酶之一。神经内分泌细胞和神经源性肿瘤中含有大量NSE［6］。小细胞肺癌是一种起源于神经内分泌细胞的肿瘤，因此NSE是其重要标志物。作为SCLC重要的肿瘤标志物之一，NSE存在着诸多局限性：对早期局限期SCLC敏感性低；在其他恶性肿瘤患者中，也可出现NSE值异常升高；不能使用血浆进行检测，因为红细胞和血小板含有NSE，溶血样本容易出现假阳性等。

胃泌素释放肽（GRP）属于胃肠激素，主要刺激胃的G细胞分泌胃泌素、参与平滑肌细胞的收缩、促进细胞间的相互作用［4］。SCLC患者往往存在高水平GRP的表达和分泌，但GRP半衰期只有2 min，稳定性差，难以检测。作为GRP的前体proGRP的半衰期更长、更稳定，可通过血清或血浆样本检测，反映GRP的水平。proGRP在正常上皮中不表达或表达非常低，在良性肺疾病和上皮来源的肿瘤中有低水平的表达［7］。研究表明，如设定proGRP的判断界值为30 pg/mL，在对各种实体瘤，如肺癌、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌、肾细胞癌和神经内分泌肿瘤内的proGRP进行检测，proGRP在 SCLC中显著升高至66%，远远高于在其他肿瘤内的表达，证明其对SCLC有较好的特异性［8-9］。

本研究显示各组内proGRP与NSE阳性率的性别和年龄的差异无统计学意义（P＞0.01）；非小细胞肺癌组和肺良性疾病组、正常对照组间NSE阳性率的差异有统计学意义（P＜0.01），非小细胞肺癌组和小细胞肺癌组NSE的差异无统计学意义（P＞0.01），说明虽然NSE阳性率的高低不能用于小细胞肺癌与非小细胞肺癌的鉴别诊断，但是可以用于肺良性疾病和恶性疾病的鉴别诊断；小细胞肺癌组与其他各组间proGRP阳性率的差别均有统计学意义（P＜0.01），证实proGRP阳性率的高低不仅可以用于肺良性与恶性疾病的鉴别诊断还可以用于小细胞肺癌和非小细胞肺癌的鉴别诊断。

本研究显示小细胞肺癌组无论是局限期还是广泛期和正常对照组、非良性疾病组、非小细胞肺癌组间比较，proGRP与NSE水平的差别均有统计学意义（P＜0.01），表明血清proGRP和NSE水平高低在小细胞肺癌的诊断中具有一定的意义，这与以往报道一致［10-11］。同时说明proGRP和NSE水平高低不仅可用于肺良性疾病组和和肺恶性疾病的鉴别诊断，还可用于小细胞肺癌和非小细胞肺癌的鉴别诊断，这与赵兵等［12］的报道一致。同时研究结果显示非小细胞肺癌组与正常对照组、肺良性疾病组间proGRP水平的差别无统计学意义（P＞0.01），非小细胞肺癌组和正常对照组、肺良性疾病组间NSE水平的差别有统计学意义（P＜0.01），可见血清NSE水平除了在小细胞肺癌时增高外，在非小细胞肺癌时也会不同程度的增高，而血清proGRP水平在非小细胞肺癌中不会增高，可见在小细胞肺癌的诊断中proGRP比NSE更特异。另外小细胞肺癌组局限期和广泛期proGRP与NSE水平的差别有统计学意义（P＜0.01），则说明血清proGRP与NSE水平不仅可以用于小细胞肺癌的诊断还可用于小细胞肺癌的临床分期。

本研究显示在小细胞肺癌的诊断中proGRP曲线下的面积要大于NSE曲线下的面积，从而显示在小细胞肺癌的诊断中proGRP要优于NSE。同时研究结果表明proGRP与NSE联合检测曲线下的面积要大于proGRP和NSE单独检测，可见proGRP与NSE联合检测可以提高小细胞肺癌的诊断效能。

由此可见，血清NSE阳性不一定是小细胞肺癌，但是高水平的血清NSE却和小细胞肺癌相关。而proGRP不论是人群阳性率还是血清水平均和小细胞肺癌相关。可见两者均可用于小细胞肺癌的诊断，但是proGRP要优于NSE。同时两者水平的高低还可用于小细胞肺癌的临床分期。proGRP与NSE联合检测可以提高小细胞肺癌的诊断效能。

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（潘子昂编辑）

Significance of ProGRP and NSE and Their Combined Application in Diagnosis of Small Cell Lung Cancer

ZHANG Su-zhen，ZHAO Xu-hui，SUN Chun-xiu，LI Shu-jun
（Laboratory Department of Xingtai People’s Hospital，Xingtai 054031，China）

Objective To explore the signification of proGRP and NSE and their combined application in the diagnosis of small cell lung cancer.Methods A retrospective study on the patients with small cell lung cancer （Small Cell Lung Cancer Group，SCLC），non small cell lung cancer（Non Small Cell Lung Cancer Group，NSCLC），benign lung diseases（Benign Lung Diseases Group）by clear diagnosis from 2014 May to 2015 January in Xingtai People's Hospital，and healthy people（Normal Control Group）was carried out.The proGRP and NSE in all groups were detected.The positive rates of proGRP and NSE of different genders and ages in all groups were compared and analyzed statistically.The ROC curves of proGRP and NSE and their combined application tests was drawn，and the areas under the ROC curve were calculated.Results The positive rate of proGRP and NSE in all groups had no gender and age differences（P＜0.01）；The positive rate of proGRP in SCLC Group was higher than the other groups（P＜0.01）.The positive rate of NSE between SCLC Group and NSCLC Group had no difference statistically（P＜0.01）；The levels of proGRP and NSE in SCLC Group both limited and extensive period were higher than those of other groups（P＜0.01）.Conclusion Both the proGRP and the NSE can be used for small cell lung cancer diagnosis，but proGRP is better than NSE.Both of them can be used in the clinical staging of small cell lung cancer.Combined application of proGRP and NSE can improve the diagnostic efficacy of small cell lung cancer.

Small cell lungcancer； Nonsmall cell lungcancer； proGRP； NSE；Electrochemical luminescence