于莹 许湄雪 刘金雷 范荣 冯惠勇 李天明

（河北科技大学，石家庄 050018）

代谢工程改造谷氨酸棒杆菌生成丙酮酸

于莹 许湄雪 刘金雷 范荣 冯惠勇 李天明

（河北科技大学，石家庄 050018）

旨在增加谷氨酸棒杆菌代谢过程中丙酮酸的积累、减少副产物的生成，利用同源重组的方法，敲除了丙酮酸代谢过程中支流代谢途径的关键基因：丙酮酸醌氧化还原酶pqo基因、丙酮酸脱氢酶pdh基因和乳酸脱氢酶lldh基因，获得了基因缺失工程菌株。利用4.5％的葡萄糖复合培养基，工程菌经摇瓶发酵48 h，丙酮酸的浓度达到14.6 g/L，而野生菌株仅为0.45 g/L；工程菌的糖酸转化率为33.18％，比野生菌提高了32.5倍。

丙酮酸；谷氨酸棒状杆菌；丙酮酸醌氧化还原酶；丙酮酸脱氢酶；乳酸脱氢酶

丙酮酸不仅是生物体内糖代谢途径中重要的有机酸之一，而且也是合成多种化合物的前体，广泛应用于食品、农药、生化等工业中［1］。其中，丙酮酸作为酸味添加剂在食品工业中具有很大的发展潜力。丙酮酸是合成丙酮酸钙的主要原料，丙酮酸钙有减肥的特效也容易被人体吸收，因此，在食品中添加丙酮酸钙受到广大消费者的青睐。随着对丙酮酸的需求量不断扩大，对丙酮酸的研究具有十分重要的意义。

生产丙酮酸的方法主要有化学合成法，酶转化法和微生物发酵法［2］。由于发酵法具有产品纯度高、成本低、转化率高、对环境污染小等优点，已成为国内外最受青睐的生产方法。自然界中有很多的微生物可以合成丙酮酸，如：球拟酵母、假丝酵母、酿酒酵母、肠杆菌属等。……