廖芬芳，陈永恒，吴清清，程琳，周晓明，王伟章（广东药科大学基础学院/广东省生物活性药物研究重点实验室，广东广州510006）

基于GFP/SCL-tTA/Bcr-abl转基因小鼠建立CML嵌合小鼠模型

廖芬芳，陈永恒，吴清清，程琳，周晓明，王伟章
（广东药科大学基础学院/广东省生物活性药物研究重点实验室，广东广州510006）

目的建立慢性粒细胞白血病（CML）的转基因嵌合小鼠模型，为靶向白血病干细胞（LSCs）治疗CML的研究提供良好的动物模型。方法 将Bcr-abl转基因小鼠与SCL-tTA转基因小鼠进行杂交，子代小鼠再与GFP转基因小鼠杂交，PCR鉴定Bcr-abl、tTA和GFP基因三阳性的小鼠（GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠）。通过诱导GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠Bcr-abl基因表达4周后，取其骨髓白细胞移植至经致死剂量（900 cGy）辐照的FVB/N野生型小鼠。移植3周后，采用Western blotting检测Bcr-abl蛋白表达，流式细胞术检测小鼠外周血GFP+中性粒细胞的比例以及脾脏和骨髓GFP+LSCs的比例。结果 PCR结果显示，GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠骨髓细胞成功植入FVB/N受体小鼠；Western blotting检测结果显示，移植小鼠的骨髓细胞中表达Bcr-abl蛋白；流式细胞术结果显示，移植小鼠的外周血GFP+中性粒细胞比例以及脾脏和骨髓GFP+LSCs的比例明显升高。结论 成功建立了GFP/SCL-tTA/Bcr-abl转基因CML嵌合小鼠模型。

慢性粒细胞白血病；转基因小鼠；Bcr-abl

慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia，CML）是一种起源于白血病干细胞（leukemia stem cells，LSCs）并严重威胁人类健康的恶性增殖性血液肿瘤。由于超过95%的CML患者均存在因染色体易位而产生的Bcr-abl融合基因，因此，Bcr-abl融合基因被公认为是CML发病的分子基础［1］。当前，尽管CML一线临床用药特异性针对Bcr-abl蛋白的酪氨酸激酶抑制剂如格列卫等能有效缓解CML［2］，但由于LSCs不依赖Bcr-abl的蛋白激酶活性存活［3］，导致酪氨酸激酶抑制剂不能彻底清除LSCs而无法治愈CML。……