万聪，黄亚萍，汪妹，肖亚梅，赵小阳

(1. 教育部蛋白质化学和鱼类发育生物学重点实验室，湖南师范大学生命科学学院，长沙　410081；2. 发育生物学教研室，南方医科大学基础医学院，广州　510515)



Helq 对干细胞多能性影响的研究

万聪1,2△，黄亚萍1,2△，汪妹1,2，肖亚梅1*，赵小阳2

(1. 教育部蛋白质化学和鱼类发育生物学重点实验室，湖南师范大学生命科学学院，长沙410081；2. 发育生物学教研室，南方医科大学基础医学院，广州510515)

目的探讨Helq缺失是否影响干细胞的多能性。方法利用CRISPR-Cas9基因编辑技术获得Helq敲除的胚胎干细胞。结果免疫荧光染色结果显示敲除Helq后，Oct4及Nanog的表达与对照组相比无明显差异，通过四倍体补偿实验证明胚胎干细胞的多能性不受影响。同时我们利用Helq敲除的胚胎干细胞继续进行体外分化，最终可以得到Day2的上胚层样细胞。通过免疫染色及real-timePCR分析，结果表明Helq敲除的胚胎干细胞分化为上胚层细胞液无明显异常。结论 Helq缺失不影响多能性干细胞的多能性。

Helq；多能性；胚胎干细胞；上胚层样细胞；CRISPR-Cas9

Helq是一种ATP依赖的具有3’-5’方向的DNA解旋酶，最早发现在古细菌和多细胞生物中[1]。已有研究表明Helq主要是修复DNA复制中所产生的链间交错(interstrandcrosslink,ICL)来维持基因组的稳定性，其作用途径与范可尼(Fanconianemia,FA)途径不一致，主要通过与复合体Bcdx2结合来参与修复[2]。当DNA出现ICL时，Helq就会在停滞的DNA复制叉上打开父本链，并重新塑造一条新的滞后链，以便于招募DNA损伤所需要的底物因子或重新开始DNA复制[3]。在哺乳动物中，Helq主要表达在睾丸、卵巢、心脏及骨骼肌等地方[4]。……