王红月，张　洋，刘　丽，顾春梅

(吉林大学第一医院 肾内科，吉林 长春130031)



PCI-neo-肝细胞生长因子对脂多糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

王红月，张洋，刘丽，顾春梅*

(吉林大学第一医院 肾内科，吉林 长春130031)

目的探讨PCI-neo-肝细胞生长因子 (PCI-neo-HGF) 对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达是否有抑制作用，以及这种抑制作用是否与对转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的抑制有关。方法体外培养GMCs并分为5组，(1)Ctrl：对照；(2) C+L：GMCs+ LPS(10 μg/ml)；(3)C+L+P-n:GMCs+LPS(10 μg/ml)+ PCI-neo(2 μg)；(4)C+L+P-n-H2：GMCs+LPS(10 μg/ml) +PCI- neo-HGF(2 μg)；(5)C+L+P-n-H8：GMCs+ LPS(10 μg/ml)+PCI-neo-HGF(8 μg);用RT-PCR的方法测定α-SMA及β-actin mRNA的表达,用Western方法检测及α-SMA,TGF-β1及β-actin的蛋白表达。结果与Ctrl 组相比，C+L及C+L+P-n 组α-SMA mRNA及蛋白表达增多(P<0.05)，TGF-β1蛋白表达增多(P<0.05)；与C+L相比，C+L+P-n-H2及C+L+P-n-H8组α-SMA mRNA及蛋白的表达均减少(P<0.05)，TGF-β1蛋白的表达减少(P<0.05)。与C+L组比较，加入TGF-β1抑制剂组α-SMA 蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论PCI-neo-HGF可抑制LPS刺激的GMCs的α-SMA 的mRNA及蛋白表达，且这种抑制作用可能与其对TGF-β1表达的抑制有关。

肝细胞生长因子；肾小球系膜细胞；α-平滑肌肌动蛋白；转化生长因子-β1

(ChinJLabDiagn,2016,20:1264)

慢性肾脏病是严重危害人类健康的疾病，在它的进展过程中有很多机制参与其发病，如系膜细胞的过度增生、细胞外基质的过度沉积[1]等。肝细胞生长因子(HGF)对肾脏的保护作用有很多研究，目前认为其可通过加速细胞外基质的降解[2]，阻断小管上皮细胞转分化及促进细胞增殖[3，4]等实现对肾脏的保护作用。目前研究认为α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)是肾小球性损伤中扮演重要角色。关于HGF对肾小球系膜细胞(GMCs)α-SMA表达的影响尚不明确，本研究主要探讨HGF对脂多糖(LPS)刺激的大鼠GMC的α-SMA的表达是否有抑制作用，以及这种抑制作用是否与对转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的抑制有关。

1　材料与方法

1．1大鼠GMC的培养及质粒转染将对数生长期的大鼠肾小球系膜细胞进行传代培养，第4代用于实验，质粒采用脂质体转染法，于转染后48 h收集细胞备用。……