刘　俊　崔　龙



肾癌患者血清VHL、HIF-1α和HIF-2α的表达及临床意义

刘俊崔龙

目的探讨血清VHL，HIF-1α和HIF-2α的表达水平与肾癌临床病理特征的关系。方法收集肾癌患者43例(肾癌组)和同期健康查体者40例(对照组)；检测两组血清VHL，HIF-1α和HIF-2α水平；测定患者癌灶最大直径；对所有患者进行6个月随访。结果与对照组比较，肾癌患者血清VHL水平明显降低，而HIF-1α和HIF-2α水平明显升高(P<0.01)；肾癌患者血清VHL、HIF-1α和HIF-2α表达与患者年龄、性别无明显相关(P>0.05)，而与病理分级、临床分期、癌灶大小以及淋巴结转移显著相关(P<0.01)；所有肾癌患者随访6个月，6例复发，37例未复发，复发组患者术后血清VHL水平明显低于未复发组，而HIF-1α和HIF-2α水平明显高于未复发组，比较差异均有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。结论 血清VHL，HIF-1α和HIF-2α水平与肾癌病理分级、临床分期、癌灶大小以及淋巴结转移显著相关，提示上述指标可成为判定肾癌发生、发展以及复发的重要指标。

肾癌；VHL基因；缺氧诱导因子-1α；缺氧诱导因子-2α

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:895～898)

肾癌为泌尿系统常见肿瘤，约占所有成人恶性肿瘤的近3%，随着生活习惯和环境的改变以及影像等检测技术的提高，肾癌的发病率呈逐年升高趋势[1]。然而，值得注意的是近30%的肾癌患者在确诊时即存在远处转移，术后患者中复发和转移的比率达40%，而传统的放化疗对转移性肾癌治疗不敏感，预后较差，5年的生存率不到10%[2]；因此，肾癌的早期诊断是提高患者生存率的关键因素[3]。

VHL基因是在遗传病性疾病Von Hippel Lindau患者中发现，位于3号染色体短臂；研究发现，VHL基因产物VHL蛋白以及缺氧诱导因子(HIF)与肾透明细胞癌的发生密切相关[4]。本研究采用酶免疫吸附法检测肾癌患者血清中VHL，HIF-1α和HIF-2α水平，分析三者与肾癌临床病理特征的关系，以期为肾癌的早诊断及复发提供更多客观的临床参考指标。

1　材料与方法

1.1一般资料

收集本院2011年5月-2012年12月收治的46例肾癌患者，研究期间失联3例，最后完成43例；其中男性32例，女性11例；年龄25～69岁，平均(51.67±5.39)岁；TMN分期：Ⅰ/Ⅱ期34例，Ⅲ/Ⅳ期9例。同期选择在我院进行健康查体者40例作为对照组，男性30例，女性10例；年龄35～70岁，平均(50.43±5.17)岁；所有对照组经血液生化、心电图和头、腹部影像学等检查均为正常，排除既往有肿瘤、自身免疫性疾病、心脑血管病以及肝肾功能障碍等病史。两组年龄、性别一般情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。诊断标准：所有肾癌患者均经CT和病理检查确认。肾癌的临床分期、病理分级等参照国际抗癌联盟(UICC)制定标准(2002年)进行[5]。所有患者病理诊断均为肾透明细胞癌，均行肾癌根治术治疗。病例入选标准：①符合肾癌诊断标准者；②检测前均未接受任何放化疗、细胞因子治疗等；③患者或患者家属签署知情协议。病例排除标准：①伴有糖尿病、高血压以及既往风湿、类风湿病者；②合并其他系统肿瘤者；③研究期间不配合者；④合并其他系统疾病影响VHL、HIF-1α和HIF-2α升高或降低者。

1.2检测指标

①血清VHL、HIF-1α和HIF-2α检测 两组均在清晨空腹采集静脉血，肾癌组分别取术前、术后患者的静脉血，血样静置1 h后离心，取血清，分装-70 ℃保存；均采用Elisa方法进行，试剂盒均由上海远慕生物科技有限公司提供；所有样本均在同一批次检测。②测定患者癌灶最大直径；③对所有患者进行6个月随访，记录复发病例。

1.3分析指标

分析血清VHL、HIF-1α和HIF-2α的表达与患者年龄、性别、病理分级、临床分期、癌灶大小和淋巴结转移等临床病理特点的关系。

1.4统计学方法

2　结果

2.1两组血清VHL、HIF-1α和HIF-2α表达比较

与对照组比较，肾癌患者血清VHL水平明显降低，而HIF-1α和HIF-2α水平明显升高，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1　两组血清VHL、HIF-1α和HIF-2α水平比较

2.2血清VHL、HIF-1α和HIF-2α水平与肾癌临床病理特征的关系

血清VHL、HIF-1α和HIF-2α表达与肾癌患者年龄、性别无明显相关性(P>0.05)，而与病理分级、临床分期、癌灶大小以及淋巴结转移显著相关(P<0.01)，见表2。

2.3未复发组和复发组患者术后血清VHL、HIF-1α和HIF-2α水平比较

所有肾癌患者随访6个月，6例复发，37例未复发；复发组患者术后血清VHL水平明显低于未复发组，而HIF-1α和HIF-2α水平明显高于未复发组，差异均有统计学意义(P<0.05，P<0.01)，见表3。

3　讨论

肾癌的临床诊断主要依据患者的症状、体征结合影响学和病理学检测，然而这些指标的影响因素较多，加之影像学对肿瘤病灶显影技术存在一定的滞后等限制，部分患者的病情并不能及时得到确认而贻误病情[6]。近年来，使用血清生物学标记物来进行早期诊断是临床检验的重要方向。目前，使用不同高通量平台对肾癌的生物标记物进行研究，然而仍没有足够且唯一的生物标记物可以用来对肾癌进行预测[7]。因此，探寻其他较为特异性的血清生物学标志物仍是时下临床研究的重点。

一般认为，癌细胞的增殖和肿瘤组织的生长、浸润以及转移有赖于肿瘤的血管形成。血管内皮生长因子(VEGF)作为糖蛋白二聚体的1种，能够增加毛细血管壁的通透性，也是当前最强的血管通透剂之一。VEGF还可特异性地刺激使得血管内皮细胞发生有丝分裂，诱导肿瘤血管的形成，从而有利于肿瘤细胞脱落、浸润周围组织血管[8-9]。研究发现，VHL基因失活引起气编码的蛋白失去正常功能，可间接激活VEGF、环氧合酶-以及血小板源性生长因子，从而促进肾癌组织的浸润及癌细胞远处转移[10]。本组结果显示，VHL在肾癌患者血清表达水平显著低于对照组健康者，与临床分期、病理分级、癌灶大小以及淋巴结转移均显著相关，与以往报道基本一致，表明血清VHL的低表达可能与肾癌的发生发展相关，其介导的系列反应可能促进肾癌细胞的增殖、浸润和远处转移。

表2　血清VHL，HIF-1α和HIF-2α水平与肾癌临床病理特征的关系

表3　未复发组和复发组患者术后血清VHL、HIF-1α和HIF-2α水平比较

缺氧或VHL基因失活均可阻碍HIF降解，从而HIF在细胞内积聚，通过HIF-1αDNA 上的识别位点结合下游靶基因VEGF等DNA 序列上的相应位点，启动靶基因VEGF等的转录，而VEGF作用于血管内皮细胞表面受体，激活系列缺血传导通路，刺激新生血管的形成，诱导肿瘤细胞的增殖及其远处转移[11]。此外，在低氧下HIF-lα可诱导斯钙素蛋白-1(STC-1)表达，后者在肾小管上皮细胞高表达，可通过调节细胞内Ca2+平衡参与肾癌细胞的增殖、浸润及其转移[12]。本组结果显示，肾癌患者血清中HIF-1α水平明显高于对照组健康者，且其与临床分期、病理分级、癌灶大小以及淋巴结转移均明显相关，与以往研究结果近似，表明血清HIF-1α的高表达可能与肾癌的发生发展相关，其介导的靶位反应在促进肾癌细胞的增殖、浸润和远处转移中发挥重要作用。

HIF-2作为肿瘤耐受低氧环境的重要标志物，由HIF-2α和HIF-1β两个亚单位构成；近年证实，肿瘤组织中HIF-2α失活可打断肿瘤血管的形成，HIF-2α水平与VEGF的表达呈正相关[13]。以往研究表明，HIF-2α的高表达与肿瘤的临床分期、低分化和不良预后密切相关[14]。本研究中，肾癌患者血清HIF-2α水平明显高于对照组健康者，且其与临床分期、病理分级、癌灶大小以及淋巴结转移均明显相关，与上述研究报道结果相近，提示HIF-2α基因也可能参与了肾癌的发生、发展机制。

综上，肾癌患者血清VHL水平明显低于对照组，而HIF-1α和HIF-2α水平明显高于对照组，血清VHL，HIF-1α和HIF-2α水平与肾癌患者病理分级、临床分期、癌灶大小以及淋巴转移显著相关，对肾癌的复发具有预测作用；因此，血清VHL，HIF-1α和HIF-2α水平可能是肾癌的早期诊断、病情评估及复发判断的重要指标。然而，血清VHL，HIF-1α和HIF-2α检测并不是肾癌特有的标志物，将上述指标应用于肾癌的早期诊断尚需与其他临床检验结合进行。

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(编辑：吴小红)

Expression of Serum VHL，HIF-1α and HIF-2α in Renal Carcinoma and Clinical Significance

LIUJun，CUILong.

XiantaoFirstPeople'sHospital，Xiantao,433000

ObjectiveTo investigate relationship between expression of serum VHL，HIF-1α and HIF-2α and the clinicopathological features in renal carcinoma.Methods43 patients with renal cell carcinoma were the renal carcinoma group and 40 healthy examinees were the control group.Levels of serum VHL，HIF-1α and HIF-2α in the 2 groups were detected.The maximum diameters of carcinoma foci were detected.Studies are needed with follow up of 6 months to record relapse cases.Relationship between expression of serum VHL，HIF-1α and HIF-2α and the clinicopathological feature in renal carcinoma were analyzed.ResultsLevel of serum VHL in the renal carcinoma group was obviously lower than the control group，while levels of HIF-1α and HIF-2α were obviously higher(P<0.01).Expression of serum VHL，HIF-1α and HIF-2α was not related to age and sex in renal carcinoma(P>0.05)，while was significantly correlated with pathological grade，clinical stages，size of carcinoma and lymphatic metastasis(P<0.01).All patients of renal carcinoma were followed up by 6 months with 6 recurrent cases and 37 non-recurrent cases.Level of serum VHL in recurrent cases was obviously lower，while levels of HIF-1α and HIF-2α were obviously higher than non-recurrent cases，there had significant differences(P<0.05，P<0.01).ConclusionLevels of serum VHL，HIF-1α and HIF-2α are correlated significantly with pathological grade，clinical stages，size of carcinoma and lymphatic metastasis，which indicates indexes mentioned above could be important indicators of judging occurrence，development and recurrence of renal carcinoma.

Renal carcinoma；VHL；HIF-1α；HIF-2α

433000 湖北省仙桃市第一人民医院(刘俊)；441021 湖北省襄阳市中心医院(崔龙)

崔龙

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.06.008

R737.11

A

1001-5930(2016)06-0895-04

2015-07-21

2016-04-25)