孙文琴 肖维薇 李静 吴群尔 张军 陈慧芬

血浆D-二聚体水平与血小板聚集检测在易栓症反复自然流产中的诊断价值

孙文琴 肖维薇 李静 吴群尔 张军 陈慧芬

目的 探讨血浆D-二聚体水平与血小板聚集功能在反复自然流产患者诊断价值。方法 选择≥2次自然流产史的非妊娠妇女167例为反复自然流产组，选取同期行孕前检查的非妊娠健康妇女98例为对照组。采用免疫比浊法和光电比浊法检测血浆D-二聚体水平和ADP诱导的血小板最大聚集率，并进行统计学分析。结果 反复自然流产组D-二聚体水平中位值0.27mg/L和ADP诱导血小板最大聚集率70.48%均比对照组高，差异有统计学意义（P＜0.01）。按年龄≤30岁和＞30岁分组，同年龄的反复自然流产组与对照组比较，D-二聚体水平和ADP诱导血小板最大聚集率均存在统计学差异（P＜0.01或P＜0.05）。反复自然流产组中19.16%患者的D-二聚体水平异常增高，而对照组4.08%，差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 反复自然流产患者易存在血浆D-二聚体水平异常增高，而ADP诱导血小板最大聚集率变化不明显，检测血浆D-二聚体水平对诊断反复自然流产者是否存在血栓前状态具有一定的临床意义。

D-二聚体 血小板聚集 反复自然流产 易栓症

反复自然流产（RSA）是指与同一性伴侣连续发生≥2次孕20周前的自然流产，其发生率4.2%，近年来，研究表明反复自然流产发生与孕妇体内高凝状态相关，具有血栓形成倾向，称为易栓症［1］。这种高凝状态使胎盘内的凝血与纤溶平衡状态被破坏，子宫螺旋动脉与绒毛微小血管发生病变，形成胎盘血栓、梗塞，影响胎盘正常血液供应，导致胎盘功能不全而引起反复自然流产［2］。本文探讨血浆D-二聚体水平和血小板聚集功能在反复自然流产中的变化及对易栓症的诊断价值。

1　临床资料

1.1一般资料 选择2015年1月至2015年6月本院经临床诊断为反复自然流产的非妊娠妇女167例（反复自然流产组），年龄22～45岁。纳入标准：连续发生≥2次自然流产史，未生育，排除生殖系统解剖学异常、肝肾功能异常、心脑血管疾病、糖尿病、高血压、甲状腺疾病、自身免疫性疾病、血栓性疾病和感染。另选择孕前检查的非妊娠健康妇女98例（对照组），年龄21～42岁。纳入标准：无不明原因自然流产史，无心脑血管疾病、肝肾疾病、糖尿病、高血压、甲状腺疾病、自身免疫性疾病、血栓性疾病、恶性肿瘤和感染，无吸烟、酗酒等不良嗜好。

1.2方法 所有受试者均空腹采集肘静脉血，置于含3.8%（w/v）枸椽酸钠抗凝采样管中，按抗凝剂与血液比例1：9混匀。用于D-二聚体检测的标本，采集后室温3000 r/min离心10min，分离出血浆，＜2h完成检测。用于血小板聚集检测的标本，采集后室温800r/ min离心5min，吸取上层富含血小板血浆350ml，再次离心，3000r/min离心10min，吸取上层无血小板的血浆350ml，＜3h完成检测。

1.3检测仪器和试剂 D-二聚体使用Siemens公司生产的INNOVANCE D-Dimer试剂（免疫比浊法），Sysmex CA-7000全自动血液凝固分析仪进行检测，按照试剂说明操作。血小板聚集使用美国CHRONOLOG公司生产的血小板聚集诱导剂ADP，由北京普利生仪器有限公司生产的LBY-NJ4A全自动血小板聚集仪采用光电比浊法进行检测。

1.4统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。计量资料偏态分布采用中位数和四分区间表示，两组间比较采用秩和检验，多组间比较采用Kruskal-Wallis Test。计数资料用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组D-二聚体水平和血小板最大聚集率比较 反复自然流产组患者的D-二聚体水平中位值0.27mg/L，正常组0.15mg/L，两组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。反复自然流产组患者的ADP诱导血小板最大平均聚集率70.48%，正常组67.09%，两组差异有统计学意义（P＜0.01）。同年龄的反复自然流产组与对照组比较，D-二聚体水平、血小板最大聚集率差异均有统计学意义。见表1。

2.2两组D-二聚体水平、血小板最大聚集率异常比较 见表2。

表2　两组D-二聚体水平、血小板最大聚集率异常比较（n）

2.3反复自然流产组不同流产次数D-二聚体水平和血小板最大聚集率比较 不同流产次数D-二聚体水平和ADP诱导血小板最大聚集率差异均无统计学意义（P＞0.05）。

表1　两组D-二聚体水平、血小板最大聚集率比较（±s）

表1　两组D-二聚体水平、血小板最大聚集率比较（±s）

注：与≤30岁对照组比较，*P＜0.001，#P＜0.05；与＞30岁对照组比较，*P＜0.001，#P＜0.05

D-二聚体（mg/L）　ADP-血小板最大聚集率（%）　n　D-二聚体（mg/L）　ADP-血小板最大聚集率（%）反复自然流产组　79　0.24*（0.16～0.36）　70.31#（67.12～72.54）　88　0.30*（0.18～0.41）　70.66#（62.28～72.96）对照组　59　0.15（0.10～0.29）　66.96（57.41～72.81）　39　0.18（0.11～0.22）　67.22（60.12～72.25）组别　＞30岁n ≤30岁

3　讨论

导致反复自然流产的病因非常复杂，研究报道易栓症与其有明显相关性。易栓症分为遗传性和获得性两类。遗传性易栓症是由于先天性的凝血、抗凝和纤溶系统蛋白缺陷或凝血基因突变打破了凝血-纤溶系统的平衡，使凝血功能增强，引起胎盘微循环障碍，导致反复自然流产。获得性易栓症是由于抗磷脂抗体、高同型半胱氨酸血症等因素存在，激活血液高凝状态，导致多发性胎盘血栓、梗塞和螺旋动脉血管病变，引起胎盘功能不足，因胚胎缺血坏死而流产［4］。

D-二聚体是纤维蛋白原在凝血酶作用下转变成纤维蛋白单体，在活化因子作用下进一步形成交联纤维蛋白，再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物。其可作为体内高凝状态和血栓形成的指标之一，血浆中水平增高表明存在继发性纤溶过程［4］。本资料结果显示反复自然流产组的血浆D-二聚体水平高于健康非妊娠妇女（P＜0.01），且以30岁年龄为界的各分组中其水平均高于相应年龄组的正常非妊娠组（P＜0.01）。这与霍梅等研究报道有所不同，其采用酶联免疫法检测D-二聚体含量，发现反复自然流产组D-二聚体含量比对照组明显降低，纤溶功能受损，促使纤维蛋白沉积影响胎盘发育［5］。由于D-二聚体检测影响因素较多，不同研究间所使用的检测设备、试剂和方法的不同可能导致结果有差异［6］。正常妊娠妇女与非妊娠妇女相比，存在生理性高凝状态，其血浆D-二聚体水平随孕周增加而逐渐增高，有利用产后子宫收缩和止血［7］。刘劲松等［8］研究认为反复自然流产患者与正常足月孕妇比较，血浆D-二聚体含量升高，表明存在继发性纤溶过程，相对于孕晚期患者有更明显的高凝易栓状态。

血小板在反复自然流产患者中起主要作用。Bick等［9］报道粘性血小板综合征是凝血蛋白/血小板缺陷相关的反复自然流产中第二常见的缺陷。血小板聚集是血小板参与止血和血栓形成的重要环节，在病理情况下血小板在外源或内源性刺激物作用下被激活，引起血栓形成，影响血液循环，导致栓塞或缺血，因此测定血小板聚集功能有助于诊断易栓症、血栓性疾病和监测抗血小板药物治疗。张宏等［10］研究显示反复自然流产未妊娠组的ADP和花生四烯酸（AA）诱导的血小板最大聚集率均显著高于健康非妊娠组；反复自然流产未妊娠和妊娠组中，ADP诱导的血小板最大聚集率异常升高率显著高于健康妊娠组。然而，Beyan等［11］研究显示ADP-血小板最大聚集率在反复自然流产患者中的变化与正常健康妇女差异无统计学意义。这些研究结果的不同还有待于进一步通过大样本量的研究来确认。

综上所述，自然反复流产患者的血浆D-二聚体水平和ADP诱导血小板最大聚集率比健康未妊娠妇女高，且自然反复流产患者多见D-二聚体水平异常升高，故血浆D-二聚体是反复自然流产患者较敏感的凝血变化指标，比ADP-血小板最大聚集率检测更能反映其体内是否存在高凝状态，对其易栓症的诊断具有一定的临床价值。

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8 刘劲松，赖晓霏.复发性流产患者凝血相关指标的改变与易栓症发生的相关性.检验医学与临床，2013，11（23）：3097～3098.

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10 张宏，范银银，张弘，等.原因不明反复自然流产患者血小板检测的意义.临床检验杂志，2012，30（7）：491～492.

11 Beyan C， Kaptan K， Ifran A. Platelet aggregation abnormalities in patients with recurrent fetal losses. Thromb Res，2007，121（3）：327～331.

201204 上海市第一妇婴保健院检验科