渗透剂在牙酸蚀症渗透性的实验研究

2016-09-10李春梅王馨黑龙江省医院口腔科黑龙江哈尔滨150001

系统医学 2016年7期

李春梅，王馨黑龙江省医院口腔科，黑龙江哈尔滨　150001

渗透剂在牙酸蚀症渗透性的实验研究

李春梅，王馨
黑龙江省医院口腔科，黑龙江哈尔滨150001

目的探讨可能影响渗透剂在牙酸蚀症渗透效果的多种因素以及各因素的作用效果。方法48颗无酸蚀症离体下切牙（2015年9月—2016年3月，黑龙江省医院口腔科），置于脱矿液中45 d建立酸蚀症模型，再随机分为16组，分别采用不同渗透剂（粘结剂和渗透树脂）和渗透时间（5 min和3 min）、不同酸蚀剂（35%磷酸和15%盐酸）和酸蚀时间（30 s和60 s）进行处理。染料浸染和激光扫描共聚焦显微镜观察渗透剂的渗透深度（PD）和酸蚀症的酸蚀症损深度（LD），并计算渗透百分数（PP）。结果渗透剂种类（粘结剂和渗透树脂）、渗透时间（5 min和3 min）对渗透剂的渗透性差异有统计学意义（P＜0.05），且相同作用时间下渗透树脂的渗透性优于粘结剂的渗透性；相同渗透剂渗透作用5 min比3 min的渗透效果更好。酸蚀剂种类（30%磷酸和10%盐酸）、酸蚀时间（30 s和60 s）对渗透剂的渗透性差异无统计学意义（P＞0.05）。结论在牙酸蚀症相同作用时间下渗透树脂的渗透性优于粘结剂的渗透性；相同渗透剂渗透作用5 min比3 min的渗透效果更好。

酸蚀症；渗透剂；粘结剂

［Abstract］Objective To explore the factors that might affect the penetration and their effects on the permeability of infiltrants in acid corrosion of youngteeth.Methods 48 extracted youngmandibular incisors were placed 45 d in the decalcification solution to establish early caries model（Department of Stomatology，Heilongjiang Hospital，September 2015-March，2016），and then randomly divided into 16 groups，with different resin materials and methods for penetration.Penetration depth（PD）and early caries lesions depth（LD）were observed，and the percentage penetration（PP）were calculated by dying infiltration and laser scanning confocal microscopy（CLSM）.Analysis of the effect of resin materials and penetration time，etching agents and acid etching time on penetration were performed.Results The two factors of penetration time and type of resin materials were proved significantly affected the permeability of infiltrants（P＜0.05），and permeability of Icon-infiltrant was found better than Single Bond 2；penetration in 5 min was found better than 3 min. Etching agents，etching time two factors were proved significantly affected the permeability of resin materials（P＞0.05）. Conclusion Permeability of Icon-infiltrant in acid corrosion of youngteeth is better than Single Bond 2；penetration of resin materials in 5min is better than 3 min.

［Key words］Acid corrosion；Resin infiltration；Adhesive

酸雾或酸酐作用于牙而造成的牙硬组织损害称为酸蚀症。渗透技术是治疗酸蚀症的微创治疗方法之一［1］。自20世纪70年代以来，渗透技术作为治疗酸蚀症的一种最小干预治疗已被广泛研究。最早的渗透剂是粘结剂［2］，近年报道了新型渗透剂—Icon渗透树脂。与粘结剂相比，渗透树脂具有高渗透性系数、低粘性、低接触角和高表面张力，能通过釉质表面孔隙渗透到脱矿层内。虽有报道，渗透树脂对较浅的牙酸蚀症（酸蚀症损位于釉质外1/2）的治疗效果较好［3］，但采用不同渗透剂及渗透前不同预处理后，在牙酸蚀症是否可获得相似的渗透效果目前尚并无相关报道。所以，本文采用牙酸蚀症为研究对象，旨在通过体外观察不同渗透剂及方法处理后渗透剂的渗透性，探讨可能影响渗透剂渗透效果的多种因素以及各因素的作用效果，以其指导临床（2015年9月—2016年3月，黑龙江省医院口腔科）。

1　材料与方法

1.1材料

Icon渗透树脂套装（DMG公司，德国），Adper Single Bond 2粘结剂（3M公司，美国），35%Gluma釉质酸蚀凝胶（Heraeus，德国），罗丹明B、荧光素钠（Sig ma公司，美国），脱矿液［2.2 mmol/L KH2PO4、2.2 mmol/L Ca（NO3）2、50 mmol/L醋酸、0.1 mmol/L NaF，5 mmol/L KOH调至pH=5.0］［4］（哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室）。

1.2设备

恒温水浴箱，激光扫描共聚焦显微镜（CLSM）。

1.3实验方法

1.3.1样本选择选择完整、无酸蚀症、无斑纹、新鲜拔出的下切牙48颗（2015年9月—2016年3月，黑龙江省医院口腔科）。仔细清理软组织后置于生理盐水中，4℃保存备用。

1.3.2样本制备在釉牙骨质界处去除牙根，蜡封闭断面。唇面开窗区2 mm×2 mm，余留牙面涂布2层指甲油，晾干。

1.3.3人工酸蚀症形成样本置于上述脱矿液中，37℃恒温水浴箱中脱矿45 d，每天换液维持有效浓度。取出样本，去离子水冲洗，吹干，肉眼见开窗区呈白斑状，即人工酸蚀症形成。去除样本表面指甲油，置于去离子水中4℃保存备用。

1.3.4实验分组实验采用四因素两水平的析因设计，将48颗牙随机分为16组，分别采用不同渗透剂（粘结剂或渗透树脂）和不同渗透时间（5 min或3 min）、不同酸蚀剂（30%磷酸或10%盐酸）和不同酸蚀时间（30 s或60 s）处理。

1.3.5样本处理方法将样本按分组处理如下：①取出样本，无油压缩空气吹干。②酸蚀剂（磷酸或盐酸）酸蚀开窗区（1 min或2 min），水枪彻底冲洗30 s，无油压缩空气吹干。③暗室中将样本放入0.1%的罗丹明B乙醇溶液37℃染色12 h，充分标记酸蚀症损微孔。④压缩空气干燥样本牙10 s，将渗透剂（粘结剂或渗透树脂）涂布于牙面开窗区，静置（1 min或3 min），多余材料用棉卷擦掉，光固化40 s。⑤样本在30%过氧化氢溶液中，37℃静置12 h，漂去未被渗透剂封闭的罗丹明B染料，去离子水冲洗60 s。⑥样本用慢速砂片垂直于牙面开窗区切成厚约1 mm试件，用不同粒度砂纸由粗到细依次打磨抛光，直至试件透光。⑦将试件置于100 μm/L荧光素钠的50%乙醇溶液中3 min，标记未被材料渗入的酸蚀症损微孔，去离子水冲洗10 s。⑧随即进行CLSM观察。

1.3.6CLSM下观察运用Image J图像处理软件在每个试件CLSM图像上选取10个位点测量渗透深度（penetration depth，PD）和酸蚀症损深度（lesion depth，LD）（依病损大小决定）。PD和LD分别为从釉质表面到红色和绿色荧光最深点的距离，每个试件取测量值的平均值记录并计算渗透百分数（percentage penetration，PP），PP=PD/LD×100%。

1.3.7统计方法应用SPSS 17.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以（±s）表示，采用单因素方差分析和多因素方差分析统计学方法进行数据分析，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2　结果

2.1单因素方差分析

按各单因素水平分组时每组24例，对渗透剂的渗透率进行单因素两水平间比较。结果（表1）显示：渗透剂种类、渗透时间自身两水平比较差异有统计学意义（P＜0.05），且相同作用时间下渗透树脂渗透性优于粘结剂渗透性；相同渗透剂渗透作用3min比1min的渗透效果更好；酸蚀剂种类、酸蚀时间自身两水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1　各因素渗透率测量值比较［（±s），%］

注：*粘结剂与渗透树脂比较，差异有统计学意义，P＜0.05；**渗透作用1min 与3 min比较差异有统计学意义，P＜0.05。

因素及水平　渗透率（±s）FP粘结剂（n=24）渗透树脂（n=24）35%磷酸（n=24）15%盐酸（n=24）酸蚀1 min（n=24）酸蚀2 min（n=24）渗透作用1 min（n=24）渗透作用3 min（n=24）41.15±3.34 51.46±12.34 44.47±4.41 48.21±4.32 48.14±4.21 44.46±4.32 38.28±8.21 45.21±4.43 5.4230.004* 0.6320.267 0.5430.284 20.3230.000**

2.2多因素方差分析

结果（表2）显示：渗透剂种类、渗透时间对渗透剂的渗透性有显著影响（P＜0.05），渗透剂种类和渗透时间之间无交互作用（P＞0.05）。酸蚀剂种类、酸蚀时间对渗透剂的渗透性无显著影响（P＞0.05）。两因素交互作用：渗透剂种类和酸蚀剂种类；渗透剂种类和酸蚀时间；酸蚀剂种类和酸蚀时间差异有统计学意义。三因素交互作用：渗透剂种类、酸蚀剂种类和酸蚀时间；渗透剂种类、酸蚀剂种类和渗透时间差异有统计学意义。

表2　四因素两水平作用下的渗透率的方差分析

3　讨论

关于人工酸蚀症模型的建立。为了更加接近早期自然酸蚀症（典型特征为表层相对完整而表层下脱矿），本实验所有离体牙均未磨除原有表面层，保留原表面无釉柱结构，这一结构在自然酸蚀症被认为是阻碍树脂渗透材料渗入的相对低孔隙率的的表层。本实验采用化学致酸蚀症法，是目前体外人工酸蚀症模型中最为常用的方法［4］；脱矿液采用部分饱和酸缓冲脱矿系统，为含氟的乙酸缓冲体系［5］；pH为5.0，使脱矿更为缓慢［6］；更有利于形成典型的表层下脱矿的早期釉质酸蚀症［7］。

此实验中，渗透剂渗透作用5 min效果优于3 min，且渗透树脂和粘结剂均表现为随渗透时间延长渗透深度加深。由此可推测，渗透剂在较短的时间内不能充分渗入酸蚀症损微孔，渗透深度不足导致渗透率降低。但在相同渗透作用时间内，渗透树脂仍比粘结剂渗透更深，原因为与粘结剂相比，渗透树脂的渗透速度更快，这与郭静等人研究结果一致［8］。此文结果表明，酸蚀剂种类（10%盐酸或30%磷酸）和酸蚀时间（30 s或60 s）对渗透剂的渗透率无显著影响。原因为人工酸蚀症制备是连续的脱矿过程，表面层微孔隙率较自然酸蚀症高，抵抗酸侵蚀的能力不及自然酸蚀症；人工酸蚀症表层结构易于被去除，暴露表层下多孔结构，便于渗透剂的渗入，这与陈洪和杨红丽等人研究结果大致一致［9-10］。

总之，在牙酸蚀症渗透树脂的渗透性优于粘结剂的渗透性，渗透剂渗透作用5 min比3 min渗透效果好。渗透技术适用于酸蚀症的治疗；同时，在酸蚀症过程的较晚阶段（如果氟化物的再矿化法被证明不可行），这与有些学者研究相悖，可能是因为龋病与酸蚀症的致病机理不同所致［11-12］，这一微创治疗理念应该作为一种备选方案，这样至少可推迟健康结构的破坏或损失。为保护口腔软组织，保证干燥的操作环境，在渗透树脂使用过程中推荐使用橡皮樟。最后，在更为复杂的治疗情况下渗透树脂可以结合传统树脂修复，这将帮助保护牙齿硬组织。

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