阿托伐他汀诱导肝脏Cyp7a1和时钟基因的表达

2016-09-07李文楷徐永吉陆远富遵义医学院基础药理教育部省部共建重点实验室贵州遵义563003

中国药理学通报 2016年5期

关键词：小鼠

李文楷，徐永吉，陆远富，刘　杰（遵义医学院基础药理教育部省部共建重点实验室，贵州遵义　563003）

阿托伐他汀诱导肝脏Cyp7a1和时钟基因的表达

李文楷，徐永吉，陆远富，刘杰
（遵义医学院基础药理教育部省部共建重点实验室，贵州遵义563003）

网络出版时间：2016-4-26 11：06网络出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160426.1106.060.html

他汀类药物是羟甲戊二酰辅酶A（HMGCR）选择性抑制剂，是临床防治冠心病的重要药物［1-2］。研究表明，阿托伐他汀能升高肝脏中胆固醇7羟化酶（Cyp7a1）的表达，改变体内胆汁酸代谢［3］，并可能与其长期使用所致肝脏不良反应有关［4］。Cyp7a1表达受时钟基因的调控，具有昼夜节律性［5］。本研究采用长期给予临床剂量阿托伐他汀，观察其对小鼠肝Cyp7a1基因和时钟基因表达的影响。

Tab 1　Effect of atorvastatin on liver index，ALT，AST，TBA and inflammation-associated genes expression（±s，n=10）

*P＜0.05 vs control

Group　Liver index　ALT　AST　TBA　Egr1　mCK Control　49.2±1.28　36.7±0.48　44.4±0.68　22.9±0.19　100±30.7　100±10.5 Atorvastatin　49.3±1.42　35.3±0.84　55.3±0.61*23.3±0.20　178±56.4　128±11.2

Tab 2　Effect of atorvastatin on Cyp7a1，FXR and circadian rhythm-related genes expression（±s，n=10）

*P＜0.05 vs control

Group　Cyp7a1　Bmal1　Clock　Cry1　Per2　Dbp　Nr1d1 Control　100.0±19.3　100.0±27.3　100.0±13.5　100.0±7.3　100.0±23.8　100.0±32.1　100.0±21.4 Atorvastatin　286.3±40.8*　300.4±54.5*　177.8±26.3*127.3±8.7　65.7±12.2　82.9±25.4　113.2±14.1

1　材料与方法

1.1药品、试剂和实验动物阿托伐他汀，Topfond Pharmaceutical Limited by Share Ltd；TRIzol、逆转录试剂盒，宝生物工程（大连）有限公司；SYBR Green，百乐中国公司。

♂昆明种小鼠，（20±2）g，由第三军医大学实验动物中心提供，饲养于遵义医学院SPF程控环境（许可证号：SYXK 黔2014-003），维持光照8∶00～20∶00。随机分为对照组和阿托伐他汀组，阿托伐他汀组每天早上9∶00 ig给予10 mg ·kg-1阿托伐他汀，每天1次，连续90 d。最后1次给药1 h后收集血和肝组织。

1.2肝毒性检测血清中的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆汁酸（TBA）用试剂盒测定。称取肝湿重，计算肝指数。取肝大叶组织，切片，HE染色，光学显微镜下观察肝组织的病理变化。

1.3实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA表达肝组织50 mg采用TRIzol提取总RNA，用Nanodrop测总RNA的浓度与质量，进行逆转录，用SYBR Green PCR扩增（40循环），以β-actin作为内参，用相对定量法进行分析。