闫宇辉，李少恒，孔　亮，姚璎珈，教亚男，陶震宇，宋　捷，杨静娴（辽宁中医药大学药学院药理学教研室，辽宁大连　116600）

NT-3高表达促进神经干细胞向胆碱能神经元分化

闫宇辉，李少恒，孔亮，姚璎珈，教亚男，陶震宇，宋捷，杨静娴
（辽宁中医药大学药学院药理学教研室，辽宁大连116600）

网络出版时间：2016-4-26 11：06网络出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160426.1106.018.html

目的体外研究神经营养因子3（neurotrophin-3，NT-3）基因转染神经干细胞（neural stem cells，NSCs）后对其向胆碱能神经元分化的影响，并探讨其机制。方法体外分离培养新生小鼠脑源NSCs，免疫荧光细胞化学法对其进行鉴定；将NSCs分为NSCs组（不作任何处理的NSCs）、GFP-NSCs组（转染GFP的NSCs）、NT-3-NSCs组（转染NT-3的NSCs），免疫荧光细胞化学法和ELISA法检测各组NSCs中NT-3的表达；免疫荧光细胞化学法和RT-PCR法检测各组NSCs向胆碱能神经元分化的能力；乙酰胆碱检测试剂盒检测乙酰胆碱分泌情况；RT-PCR法检测Notch信号通路相关靶基因Hes1、Mash 1和Neurogenin 1（Ngn1）表达情况。结果免疫荧光细胞化学法结果显示，NSCs表达其特异性标志蛋白

Nestin

神经干细胞；阿尔茨海默病；神经营养因子3；胆碱能神经元；分化；Notch信号通路

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）又称老年性痴呆，是中老年人常见的以进行性记忆力减退和认知功能障碍为主要表现的神经退行性疾病［1］，典型的病理特征为大脑皮层和海马区出现老年斑与神经原纤维缠结，病灶周围持续存在的炎症反应和氧化应激损伤导致大量神经元溃变丢失、脑组织萎缩，其中以基底前脑胆碱能神经元丢失最为严重，引起学习与记忆障碍［2］。目前AD的治疗主要是应用胆碱酯酶（AChE）抑制剂，从而升高大脑中乙酰胆碱（ACh）的浓度。……