苏美鲜，杨玉秀，李凤巧



两种方法在宫颈癌筛查中的临床应用价值比较

苏美鲜，杨玉秀，李凤巧

目的探讨两种方法在宫颈癌筛查中的应用价值及可行性。方法选取在我院行宫颈癌筛查的684例患者为研究对象，分别采用乳头瘤病毒DNA(HPV-DNA)检测和宫颈细胞DNA定量分析两种方法进行宫颈癌筛查，分析比较两种方法的检测结果。结果经组织病理检查，684例患者中，良性644例，恶性40例；其中HPV-DNA检测与病理结果一致者良性465例，恶性38例，诊断准确率为73.54%(503/684)；宫颈细胞DNA定量分析与病理结果一致者良性583例，恶性29例，诊断准确率为89.47%(612/684)。经检测，HPV-DNA敏感度为95.00%，高于宫颈细胞DNA定量分析的72.50%(P<0.01)；宫颈细胞DNA定量分析的特异性和准确率均高于HPV-DNA检测结果(P<0.01)。结论HPV-DNA检测敏感度较高，具有预警作用，便于预后观察；宫颈细胞DNA定量分析特异性及准确率较高，适用于宫颈癌和癌前病变的筛查工作。

宫颈癌；HPV-DNA检测；宫颈细胞DNA定量分析

宫颈癌主要发生在宫颈被覆上皮部位，其组织学类型常表现为鳞癌、腺癌及腺鳞癌，是由高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染而引起的，且近年发病率呈逐年上升趋势。因此，宫颈癌和癌前病变的早期发现对于宫颈癌的治疗有决定性的意义，而有效的筛查方法最为重要[1]。目前，液基细胞学检查(TCT)已经替代了宫颈涂片，但是应用细胞病理学筛查宫颈癌无法预测评估其病变发展趋势。有学者建议，将HPV-DNA检测和宫颈细胞DNA定量分析应用于宫颈癌的早期诊断[2]。本研究探讨HPV-DNA检测和宫颈细胞DNA定量分析两种方法在宫颈癌筛查中的应用价值及可行性，报告如下。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2012年7月～2014年7月在我院行宫颈癌筛查的684例患者为研究对象(均行病理检查)，分别采用HPV-DNA检测和宫颈细胞DNA定量分析两种方法进行宫颈癌筛查。其中，年龄18～68岁；孕次0～9次，平均4次；产次0～5次，平均2次。所有患者一般资料具有可比性。本研究经医院伦理委员会认证批准，患者知情并签署相关同意书。

1.2试剂HPV-DNA分型检测仪和试剂盒均为上海透景生命科技有限公司产品，全自动细胞DNA定量分析仪由北京普朗新技术有限公司生产。

1.3方法

1.3.1HPV-DNA检测采用HPV基因分型检测试剂盒，使用PCR基因芯片技术，严格按说明书进行操作，检测18种高危型HPV和5种低危型HPV。检测方法：将采样器放于宫颈口处进行逆时针旋转3圈，然后将采样时使用的聚酯纤维拭子置于病毒的采样液中行HPV-DNA检测，最后所有患者行病理检查，并以此检查作为最终诊断依据。

1.3.2宫颈细胞DNA定量分析样本采集和制备：将TCT检测后病变在未明确意义的非典型鳞状上皮细胞(ASCUS)及ASCUS病变以上患者的标本再次进行制片，用95%乙醇固定，经Feulgon染色后进行DNA定量分析。DNA倍体检测：将制备好的玻片用全自动细胞DNA定量分析仪进行扫描，扫描时同一玻片上的淋巴细胞核DNA含量为参照细胞的2倍体。

1.4评价方法采用敏感度、特异性和诊断准确率对两种检测方法进行比较。

1.5统计学方法数据采用SPSS 18.0软件进行统计分析，定性数据采用χ2检验，以P≤0.05为差异具有统计学意义。

2　结　果

2.1两种检测方法与病理检查结果比较见表1、2。经组织病理检查，684例患者中，良性644例，恶性40例；其中，HPV-DNA检测与病理结果一致者良性465例，恶性38例，诊断准确率为73.54%(503/684)；宫颈细胞DNA定量分析与病理结果一致者良性583例，恶性29例，诊断准确率为89.47%(612/684)。

表1　HPV-DNA检测与病理检查结果比较　(例)

表2　宫颈细胞DNA定量分析与病理检查结果比较　(例)

2.2两组检测方法敏感度、特异性和诊断准确率比较见表3。经检测，HPV-DNA敏感度为95.00%，高于宫颈细胞DNA定量分析的72.50%；宫颈细胞DNA定量分析的特异性和准确率均高于HPV-DNA检测结果。

表3　两组检测方法敏感度、特异性和准确率比较

3　讨　论

宫颈癌的发病过程是多因素、多步骤、多途径的，其涉及到抑制癌基因细胞的失活和癌基因细胞的激活，染色体的结构和数量发生变化，从而产生非整倍体，而宫颈病变的标志是非整倍体[3]。因此，可通过检测细胞内DNA含量来诊断是否属于肿瘤细胞。

TCT检测能够清晰观察患者细胞结构和形态的变化，且可以避免丢失刮板上的大量细胞，其在敏感度和准确率方面较巴氏刮片有了很大的提高，但是在判读涂片的时候容易受到外界因素的影响，从而导致阴性率较高，极易将宫颈癌和癌前病变漏检[4]。HPV-DNA检测的核酸杂交法主要有直接核酸探针法、靶DNA扩增法和杂交信号放大法三种，其中直接核酸探针法最为常用。由于常规的细胞学检测对于HPV感染容易出现假阳性和假阴性的结果，所以HPV-DNA检测常用杂交捕获法[5]。本次研究数据显示，HPV-DNA敏感度为95.00%，高于宫颈细胞DNA定量分析的72.50%，说明HPV-DNA检测适用于预后观察。同时，HPV-DNA检测还具有早期跟踪及预警的作用，特别是不能确定宫颈细胞发生炎症还是产生癌前病变时就要通过HPV-DNA检测来鉴别。

宫颈细胞DNA定量分析可以精确地测定出细胞核DNA的倍体值，获得肿瘤的生物学特征，而判读涂片时采用自动化分析，其可在很大程度上降低人为因素造成的误差。染色体的重组、片段增多或缺失和染色体数目发生变化，均能导致非整倍体的扩增，最终产生肿瘤。本研究数据显示，宫颈细胞DNA定量分析的特异性和准确率分别为90.53%、89.47%，高于HPV-DNA检测，说明宫颈细胞DNA定量分析适用于宫颈癌和癌前病变的筛查工作。此外，本研究两种检测方法下均产生误诊现象，其主要原因是：①激素治疗、放射治疗、激素水平紊乱、缺乏维生素B12及HIV病毒和HPV病毒感染均可以导致非整倍体的扩增，但将这些影响因素排除后细胞可以恢复到正常整倍体。②细胞图像分析系统不扫描成团细胞和重叠细胞，从而造成误诊。③检测人员操作不当，使DNA分子与较多的染色剂相结合，从而出现恶性或良性肿瘤的误诊。

综上所述，HPV-DNA检测敏感度较高，具有预警作用，便于观察；宫颈细胞DNA定量分析特异性及准确率较高，适用于宫颈癌和癌前病变的筛查工作。

[1]赵春兰，张会辰，王建，等．宫颈细胞DNA定量分析、HPV-DNA检测与液基细胞学检查在宫颈癌筛查中的应用价值[J]．河北医药，2013，35(6)：860-863．

[2]阳艳，吴绪峰，张敦兰．DNA定量分析和高危型HPV-DNA检测在ASCUS分流诊断中的意义[J]．肿瘤防治研究，2013，40(7)：671-674．

[3]钟萍萍，顾依群，王军，等．DNA定量分析在宫颈癌筛查中的应用[J]．中华病理学杂志，2013，42(7)：469-470．

[4]张文娟，东燕，孙绪兰，等．子宫颈癌筛查方法的应用及研究进展[J]．现代生物医学进展，2012，12(23)：4597-4600．

[5]贾咏存．应用细胞DNA倍体定量分析联合HR-HPV检测筛查宫颈癌[J]．河北联合大学学报(医学版)，2012，14(1)：18-19．

(2016-03-25收稿2016-05-17修回)

(本文编辑贡树基)

546100广西壮族自治区来宾市人民医院妇科

[中国图书资料分类号]R 737.33B

10.16485/j.issn.2095-7858.2016.03.057