刘越峰　罗卫民　张勇　钟晓东



·基础研究论著·

miRNA-200b通过靶向VEGF抑制视网膜母细胞瘤细胞生长与侵袭

刘越峰罗卫民张勇钟晓东

目的明确miRNA-200b是否通过调控靶向血管内皮生长因子(VEGF)的表达而抑制视网膜母细胞瘤细胞的生长与侵袭，进一步揭示miRNA-200b抗肿瘤的分子机制。方法将视网膜母细胞瘤Y79细胞分成6组：miRNA-200b、miRNA-NC、sh-VEGF、shRNA-NC、miRNA-200b+sh-VEGF、miRNA-NC+shRNA-NC组。荧光素酶报告系统检测miR-200b对VEGF的3’-非翻译区荧光素酶活性的影响；蛋白免疫印迹法检测sh-VEGF转染的干扰效果；MTS实验与Transwell侵袭实验分别检测上述各组对视网膜母细胞瘤细胞增殖与侵袭的影响。结果荧光素酶报告检测结果显示，miR-200b能特异性地与VEGF的3’-非翻译区结合，并抑制其荧光素酶的活性；蛋白免疫印迹法显示，sh-VEGF转染组中VEGF的蛋白表达水平较对照组明显下调；MTS实验结果显示，转染miRNA-200b 组与sh-VEGF组48 h后视网膜母细胞瘤细胞的生存率均低于各自对照组(P均<0.05)；而共转染miRNA-200b+sh-VEGF组 48 h后视网膜母细胞瘤细胞的生存率低于对照组、miRNA-200b组、sh-VEGF组(F=9.887,P均<0.05)；Transwell侵袭实验显示，转染miRNA-200b组与sh-VEGF组48 h后视网膜母细胞瘤细胞的穿膜能力均低于各自对照组(P均<0.05)；而共转染miRNA-200b+sh-VEGF组 48 h后视网膜母细胞瘤细胞的穿膜能力低于对照组、miRNA-200b组、sh-VEGF组(P均<0.05)。结论miRNA-200b通过靶向调控VEGF的表达而抑制视网膜母细胞瘤细胞的生长与侵袭。

视网膜母细胞瘤；微小RNA-200b；血管内皮生长因子生长；侵袭

视网膜母细胞瘤的治疗目的以根治肿瘤和保护有效视力为主，但是一些放射治疗和化学治疗的方式可能引起干眼病、视神经病变、视网膜病变、白内障或继发于眼眶发育不良的面部畸型等病症，眼球的摘除术会使病人永久性的丧失患侧视力；而继发的肿瘤及视网膜母细胞瘤的转移更是致命性的，因此现有的治疗效果常常是有限的[1]。基因治疗的发展也为视网膜母细胞瘤的治疗提供了新的方法，可避免彻底地眼球摘除或放化疗等带来的继发疾病，因此有效作用靶点的寻找也成为了一个热点。……