袁忠民　梁琳　唐晓梅



·基础研究论著·

组蛋白去乙酰化酶抑制剂对胶质瘤细胞增殖及E2F1表达的影响

袁忠民梁琳唐晓梅

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)对胶质瘤细胞增殖及E2F1表达的影响。方法体外培养胶质瘤细胞U251，用2个E2F1干扰质粒she2f1a和she2f1b转染细胞，空载体BS/U6为对照，噻唑蓝比色法及核染色法检测细胞增殖率；TSA处理U251细胞2 h、4 h、8 h，及多种HDACIs包括曲古菌素A(TSA)TSA、伏立诺他(SAHA)、M344、丁酸钠(NaBu)NaBu、丙戊酸(VPA)、苯甲酰胺(M344)处理细胞8 h，二甲基亚砜(DMSO)处理为对照，蛋白免疫印迹法检测E2F1表达；用TSA处理8、12、24 h，DMSO处理为对照，噻唑蓝比色法分析细胞增殖率；采用多种HDACIs(TSA，SAHA, NaBu, VPA，M344)处理细胞24 h，噻唑蓝比色法分析细胞增殖率。结果与BS/U6比较，2个E2F1干扰质粒she2f1a和she2f1b都能沉默E2F1表达和抑制细胞增殖(P<0.05)；与对照组比较，TSA处理细胞2 h和4 h未见抑制E2F1表达，处理8 h能抑制E2F1表达，其它HDACIs均能抑制E2F1表达；与对照组相比，TSA处理8 h未影响细胞增殖率(P>0.05)，但TSA处理12 h能抑制细胞增殖(P<0.05)，处理24 h抑制效应更强(P<0.05)。而且，其它HDACIs均能抑制细胞增殖(P<0.05)。 结论HDACIs能抑制胶质瘤细胞E2F1表达及其介导的细胞增殖。

神经胶质瘤；E2F1；组蛋白去乙酰化酶抑制剂

神经胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤，恶性增殖是其主要特点之一，亦是造成高复发率的首要原因[1]。基于分子生物学和遗传学的研究表明，在高级别(WHO分级为Ⅲ和Ⅳ级)的胶质瘤样本中，调控细胞周期的关键蛋白的表达和功能出现明显异常[2]。如约25%的肿瘤样本中发现抑癌基因Rb缺失，约15%的样本中发现细胞周期素依赖性蛋白激酶 (CDKs)家族成员CDK4或CDK6活性异常增强，而抑癌基因p16在多达50%～70%的样本中缺失等[3-4]。这些信号的异常使得下游E2F蛋白家族(共有8个成员，E2F1～8)中关键分子转录因子E2F1的活性失去控制，失控的E2F1驱动细胞持续分裂，恶性增殖[5]。本研究采用小分子干扰、噻唑蓝比色法、蛋白免疫印……