卢晓华，邹军辉，郑　威，杨建设，王　蒲△（.西北师范大学生命科学学院，甘肃兰州730070；.中国科学院深圳先进技术研究院生物医药与技术研究所，广东深圳58055）

LIGHT作为EBNA1 DNA疫苗佐剂的免疫效应研究

卢晓华1，2，邹军辉2，郑威2，杨建设1，王蒲2△（1.西北师范大学生命科学学院，甘肃兰州730070；2.中国科学院深圳先进技术研究院生物医药与技术研究所，广东深圳518055）

目的研究LIGHT作为免疫佐剂在EB病毒核抗原1（EBNA1）DNA疫苗诱导免疫反应中的作用。方法以Balb/c小鼠肝脏cDNA为模板，PCR扩增构建真核表达载体pcDNA3.1-LIGHT；转染细胞，验证LIGHT蛋白的表达；采用电脉冲方法，以LIGHT质粒为佐剂与EBV DNA疫苗联合免疫小鼠，测定血清中EBNA1特异性抗体；分离和收集小鼠脾脏淋巴细胞，经EBNA1抗原刺激后，测定细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）的分泌水平。结果PCR扩增出LIGHT目的片段，大小为720 bp；蛋白质免疫印迹法（Western blotting）鉴定结果：在蛋白Marker相对分子质量26×103上方有单一清晰目的条带，表明有LIGHT蛋白表达；免疫小鼠血清测定实验结果：LIGHT联合DNA疫苗实验组的抗体滴度是单独DNA疫苗免疫组的3倍；脾淋巴细胞因子测定结果表明LIGHT联合免疫组能明显增强IFN-γ的分泌。结论LIGHT作为免疫佐剂，可依赖其介导的信号通路对抗体的产生和相关细胞因子的分泌具有显著促进作用。

疱疹病毒4型，人；疫苗，DNA；佐剂，免疫；LIGHT；电脉冲免疫

EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）是一种人类γ疱疹病毒，在人群中感染非常普遍［1］，与多种疾病的发生有关，如鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤和胃癌等［2］。EB病毒核抗原1（EBNA1）是EBV感染人体后编码表达的DNA结合蛋白，是EBV DNA复制、病毒基因维持终生感染和B淋巴细胞永生化过程中唯一必需的病毒蛋白［3-4］。……