临床来源副溶血弧菌毒力基因及耐药性分析
2016-09-01周方满谢红意叶鸿雁顾大磊葛婷婷
周方满,谢红意,叶鸿雁,顾大磊,葛婷婷
临床来源副溶血弧菌毒力基因及耐药性分析
周方满,谢红意,叶鸿雁,顾大磊,葛婷婷
目的了解急性腹泻患者中副溶血弧菌的分布、毒力基因及耐药性。方法对急性腹泻病例的粪便标本进行致病菌分离培养,采用聚合酶链反应(PCR)方法开展tlh、tdh和trh毒力基因检测,采用VITEK2 Compact细菌分析系统对副溶血弧菌分离株进行药敏试验。结果从2 307例腹泻病患者粪便标本中检出副溶血弧菌180株,分离率为7.8%。副溶血弧菌感染主要发生在7—10月份,其中8月份最多。毒力基因检测发现171株tdh阳性,占95.0%;4株trh阳性。副溶血弧菌对氨苄西林、头孢唑啉、头孢西叮的耐药率分别为96.7%、88.9%、23.3%,对其他实验药物敏感,未发现多重耐药菌株。结论副溶血弧菌感染在本地区夏秋季急性腹泻中占有重要地位,对青霉素类、第一代和第二代头孢药物的耐药率较高,tdh是副溶血弧菌最主要的毒力基因。
副溶血弧菌;毒力;耐药性
1 资料与方法
1.1标本来源与鉴定收集宁波市北仑区人民医院2014年4月至2015年10月急性腹泻患者2307例,符合年龄1~80岁,每天排便≥3次,且大便性状有改变(呈稀便、水样便、黏脓便或脓血便等),病程≤14 d的腹泻患者。标本采集后直接接种于碱性蛋白胨水进行增菌,18~24 h后接种至TCBS平板,VP的分离培养与鉴定按《全国临床检验操作规程》(第三版)[2]进行。所需生化培养基和生化试剂购自杭州天和微生物试剂有限公司,采用法国生物梅里埃VITEK2 Compact细菌分析系统进行细菌鉴定。1.2毒力基因检测将分离鉴定的VP菌株,接种血平板,经37℃过夜培养,挑取3~5个火柴头大小菌量悬浮于灭菌蒸馏水,煮沸10 min,然后13 000 r/min离心10 min,留取上清(含VPDNA模板)。……
