CAV1脚手架样结构域多肽抑制HEp2细胞生长的实验研究
2016-09-01顾栋桦付琳琳平金良
现代实用医学 2016年7期
顾栋桦,付琳琳,平金良
CAV1脚手架样结构域多肽抑制HEp2细胞生长的实验研究
顾栋桦,付琳琳,平金良
目的研究CAV1脚手架样结构域(CSD)多肽对喉鳞癌细胞株HEp2细胞生长的影响及其机制。方法CSD多肽和乱序多肽由人工合成得到,并在N'末端用生物素标记,用免疫细胞化学法检测CSD多肽在HEp2细胞中的内化情况,细胞生长能力用MTT法检测;流式细胞仪检测HEp2细胞的细胞周期及细胞凋亡;免疫印迹法检测HEp2细胞中Erk1/2蛋白的表达及磷酸化程度。结果免疫细胞化学检测显示CSD多肽能够较好的进入HEp2细胞内;用CSD多肽处理细胞能够明显抑制肿瘤细胞的生长,使更多的细胞处于G0/G1细胞静止期,并能够增加HEp2细胞的凋亡率;CSD多肽不影响HEp2细胞中Erk1/2蛋白的表达,但能明显减少Erk1/2蛋白的磷酸化水平。结论CSD多肽能够抑制HEp2细胞的生长,并且促进其细胞凋亡;Erk1/2蛋白的磷酸化水平下降可能是其重要的分子机制。
Caveilin-1;细胞生长;多肽;鳞状细胞癌
Caveolin-1(CAV1)是一种细胞膜蛋白,是构成细胞膜上一种小凹结构的关键成分。目前研究发现CAV1在细胞膜上的信号转导蛋白活性调节中发挥重要作用,并参与调控细胞的生物学行为。CAV1蛋白具有一个脚手架样结构域(CSD),依赖这个结构可以和许多信号转导相关蛋白结合,抑制蛋白的酪氨酸激酶活性[1]。本研究用体外细胞实验来研究人工合成的CSD多肽对喉鳞癌细胞株 HEp2细胞生长的影响,并探讨CSD多肽做为抗肿瘤药物的可行性。现报道如下。
1 资料与方法
1.1材料与试剂CSD多肽序列由上……
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