李云龙，李　俭，李昌盛，李静辉，孟　宇，杨焕民，李士泽,△

(1.黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，2.动物科技学院，大庆 163319)



冷应激条件下猪睾丸细胞中RNA结合基序蛋白3过表达对Caspase 3表达的影响*

李云龙1，李俭2，李昌盛2，李静辉2，孟宇2，杨焕民2，李士泽1,2△

(1.黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，2.动物科技学院，大庆 163319)

目的：探讨冷应激(32℃)条件下，猪睾丸(ST)细胞系中RNA结合基序蛋白3(RBM3)过表达时凋亡蛋白半胱天冬酶3(Caspase 3)表达量变化情况。方法：利用本实验室成功构建的携带绿色荧光蛋白(GFP)的RBM3过表达慢病毒载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-RBM3和空病毒载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-DEST分别感染ST细胞，作为过表达病毒(OEV)组和空载体病毒(EVV)组，此外还设立野生型细胞(WTC)组作对照，利用实时荧光定量RCR(qPCR)法和Western blot分析法检测各组中RBM3 mRNA和蛋白的表达情况。然后对各组细胞进行37℃以及32℃(2 h、4 h，8 h)的冷应激处理，利用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测各组Caspase 3表达量的变化。结果：OEV组RBM3基因和蛋白相对表达量高于EVV组和WTC组。在37℃以及32℃冷应激实验(2 h、4 h，8 h)中，OEV组Caspase 3表达量显著低于EVV组和WTC组。结论：冷应激ST细胞中RBM3过表达能够显著地降低Caspase 3的表达程度，为RBM3基因具有抵抗低温诱导ST细胞凋亡作用提供实验依据。

RNA结合基序蛋白3；冷应激；过表达；猪睾丸细胞系；半胱天冬酶3

猪对寒冷比较敏感，尤其是初生仔猪，其生存的临界温度为34℃。由于临界温度较高，仔猪体温调节机能未发育完善。所以在出生后72 h内因受冻而死的仔猪占很大比例。同时寒冷暴露也使猪的生产性能降低，易患睾丸损伤等疾病，这种情况给我国畜牧业造成的的损失不容估量[1]。……