唐 　 洁，　崔 　 励，　吴 明 杰

(大连工业大学 轻工与化学工程学院, 辽宁 大连　116034 )



产7α,15α-双羟基去氢表雄酮的球黑孢菌紫外诱变育种及发酵条件

唐 洁，崔 励，吴 明 杰

(大连工业大学 轻工与化学工程学院, 辽宁 大连116034 )

球黑孢菌可以在去氢表雄酮(DHEA)的C-7α和C-15α位进行双羟基化反应，生成7α,15α-双羟基去氢表雄酮(7α,15α-diOH-DHEA)。以球黑孢菌FN-A127为出发菌株进行紫外诱变，筛选出最佳菌株FN-A7，并对FN-A7进行遗传稳定性研究和发酵条件优化。结果表明，紫外诱变最佳照射时间为15 min，菌株FN-A7的遗传稳定性良好。在发酵培养基中加入2 g/L的DHEA，在8%的接种量、30 ℃进行发酵，突变菌株FN-A7将DHEA转化为7α,15α-diOH-DHEA的产率可达到31.96%。

球黑孢菌；去氢表雄酮；紫外诱变；发酵条件

0　引　言

屈螺酮是新一代甾体类避孕药，由于其副作用小、毒性低、耐受性好，是目前最好的第4代口服避孕药之一。7α,15α-双羟基去氢表雄酮(7α,15α-diOH-DHEA)是合成屈螺酮的重要中间体[1-2]。多种真菌能进行7α,15α-diOH-DHEA的微生物转化，其中亚麻刺盘孢菌(Colletotrichumlini)和赤霉菌(Gibberellaintermedia)的使用较为广泛[3]。亚麻刺盘孢菌能引起植物炭疽病[4]；赤霉菌引起的麦类赤霉病导致受侵小麦籽粒中含有真菌毒素对食品安全和人畜健康造成危害[5]。荷兰联合利华公司在2004年提出了球黑孢菌提取物可以作为化妆品中的添加剂使用[6]，说明球黑孢菌具有较高的生物安全性。球黑孢菌作为甾体羟基化反应的微生物，之前报道可以进行的羟化反应位置有C-11α、C-15α和C-19位[7-8]。本文以球黑孢菌FN-A127为出发菌株，研究了使用球黑孢菌将去氢表雄酮(DHEA)转化为7α,15α-diOH-DHEA，并讨论了菌种的紫外诱变育种和发酵条件。……