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异槲皮苷-β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶性质

2016-08-31徐丹,金凤燮,鱼红闪

大连工业大学学报 2016年4期
关键词:性质

徐   丹, 金 凤 燮, 鱼 红 闪

(大连工业大学 生物工程学院, 辽宁 大连 116034 )



异槲皮苷-β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶性质

徐 丹,金 凤 燮,鱼 红 闪

(大连工业大学 生物工程学院, 辽宁 大连116034 )

采用分子筛及离子交换法对微生物Absidiasp.R42g所产异槲皮苷-β-葡萄糖苷酶进行分离纯化,并研究其酶学性质。结果表明,异槲皮苷-β-葡萄糖苷酶的分子质量为62 ku,最适温度为40 ℃,最适pH为5.0。在50 ℃以下,pH 4.0~6.0,相对酶活力较稳定,Na+、K+、Ca2+3种金属离子对相对酶活力无影响;而在Fe3+、Cu2+两种金属离子存在的情况下,相对酶活力为零;酶反应结果显示该酶的最大反应速度和米氏常数分别为6.711 mmol/(L·h) 和18.89 mmol/L。

异槲皮苷-β-葡萄糖苷酶;分离纯化;酶性质

0 引 言

异槲皮苷(Isoquercitrin)为黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化、降压等生物活性[1]。异槲皮苷的3-C位水解掉葡萄糖基,成为槲皮素(quercetin),该类化合物及其衍生物同属于类黄酮化合物,在果蔬及中草药中大量存在。槲皮素具有广泛的生物活性,不仅对癌症有化学预防作用,还具有抗癌和抗突变等多种生理功能。近期研究还发现它是强有力的肿瘤多药耐药的逆转剂。人体对槲皮素的不良反应表现不明显,所以具有良好的开发前景和药用价值[2]。本实验研究了利用酶水解法由异槲皮苷制备槲皮素所需的酶,并对其酶学性质进行了探讨。

1 材料与方法

1.1材料

液体培养基:12%的槐花浸出液中加入48%的麦芽汁,糖度为5°;菌种:Absidiasp.R42g,实验室保藏。

1.2方法

1.2.1酶蛋白的分离纯化

1.2.1.1粗酶液的分离

将菌种接种于经过高温灭菌的液体培养基中,在最佳发酵条件下发酵3~5 d。……

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