汤海峰, 姜　丹, 孟令军, 王　迪, 王彦峰, 刘　艳

(吉林大学 生命科学学院, 吉林 长春　130012)



荧光定量法分析液体发酵中杂菌污染的实验设计

汤海峰, 姜丹, 孟令军, 王迪, 王彦峰, 刘艳

(吉林大学 生命科学学院, 吉林 长春130012)

设计了利用荧光定量PCR法检测基因工程菌液体发酵过程中杂菌污染的实 验方法。实验结果表明,与纯培养相比,在由重组大肠杆菌JM109、枯草芽孢杆菌和少量未知杂菌组成的多元共培养体系中,重组大肠杆菌JM109的生长和枯草芽孢杆菌的生长均被抑制。在发酵终点两种菌体在发酵液中的总量与大肠杆菌的初始接种量具有显著的相关性。通过将核酸快速提取、荧光定量PCR和微生物生长特性分析等多项实验技术有机结合,形成一个综合性实验项目并应用于本科生实验教学,提高了本科生生物学综合实验技能。

染菌检测; 荧光定量; 液体发酵

人们对生物活性物质的需求不断提高,通过天然成分的分离提取已经难以满足巨大的市场需求。基因工程菌发酵技术通过定向改造微生物或动植物细胞并进行大规模发酵培养,实现了生物活性物质的生产以满足市场需求。目前,基因工程菌发酵技术已经被用来生产人胰岛素、人细胞白介素、人干扰素、人溶菌酶以及各种人用或动植物用疫苗[1-6]。

在生物活性物质的发酵生产过程中防范和控制杂菌污染是重要环节之一。发酵过程中杂菌会抑制目标细胞的生长从而降低活性物质的产量、增加生产成本。……