王文君　陆　森　吴士超　缪凤琴　潘　宁　张建琼

(东南大学医学院，南京210009)



·免疫学技术与方法·

定量PCR检测HLA-C等位基因表达方法的建立和初步应用①

王文君陆森②吴士超缪凤琴潘宁张建琼

(东南大学医学院，南京210009)

①本文受国家自然基金青年科学基金项目(81201601)资助。

②南京医科大学第一附属医院普外科肝脏外科，南京210029。

目的：建立实时定量PCR方法检测同一个体两条不同的HLA-C等位基因的表达水平。方法：构建HLAⅠ类等位基因外显子2和3数据库，设计等位基因特异性系列引物，建立等位基因定量PCR方法；在数据库和835例汉族人外周血标本中对方法进行理论和实验验证；检测并比较20对肝癌和癌旁组织标本中HLA-C等位基因的表达水平。结果：本实验设计的20对引物能检测23种杂合基因型中不同的HLA-C等位基因，覆盖汉族人群中出现频率大于0.96%的个体；55%(11/20)的肝癌组织中HLA-C位点两条等位基因表达水平变化不一致。结论：成功建立了针对汉族人群的HLA-C等位基因表达水平的检测方法；肝癌组织中普遍存在着两条HLA-C等位基因表达水平变化不一致的现象。

定量PCR；HLA-C；等位基因特异性；肝癌

经典HLA(Human leucocyte antigen，HLA)Ⅰ类分子在免疫学上的主要功能是通过与相应受体结合调节CD8+T细胞、NK细胞等效应细胞的活化，大量研究表明经典HLAⅠ类分子表达水平异常是肿瘤细胞、病毒感染细胞的常见免疫逃逸方式，显著影响着肿瘤免疫、感染免疫以及自身免疫等疾病进程[1,2]。

经典HLAⅠ类基因包括HLA-A、-B、-C三个基因座位，在人群中具有高度多态性，绝大多数个体的这三个位点为杂合子。……