李景喜，赵金泉，尹晓斐，孙承君，陈军辉，郑　立，王小如

(1.国家海洋局　第一海洋研究所　海洋生态研究中心，山东　青岛　266061；2.青岛大学公共卫生学院，山东　青岛　266021)



基于准确质量数对肽族[γ-(Glu-Cys)n-Gly]色谱-质谱分析研究

李景喜1*，赵金泉1,2，尹晓斐1，孙承君1，陈军辉1，郑立1，王小如1

(1.国家海洋局第一海洋研究所海洋生态研究中心，山东青岛266061；2.青岛大学公共卫生学院，山东青岛266021)

基于多肽γ-(Glu-Cys)n-Gly系列化合物合成的递增规律性，利用Trap-MS离子筛选功能实现多肽的定性定量分析。首先利用多肽分子中巯基与单溴二胺(mBBr)发生缩合反应，生成具有荧光信号的多肽衍生物，比较衍生化前后分子量发现多肽与mBBr的反应比例为1∶1，荧光信号强度1周内稳定性较好。优化了色谱分离及质谱条件，建立了HPLC-Trap-MS定性定量分析方法，离子提取结果显示:多肽化合物基于其理论分子量定性分析准确快速，化合物分离效果明显，PC2,PC3,PC4,PC5和PC6系列标准溶液的线性范围宽，相关系数(r)大于0.999，各化合物的方法检出限分别为0.13，0.02，0.17，0.39，0.82 mg/L，化合物的回收率为89.0%～99.5%；相对标准偏差(RSD)小于3.5%；多肽化合物的荧光标记和Trap-MS筛选可实现荧光与质谱双重检测器的定量分析，该方法可对多肽系列化合物进行快速、准确的测定。检测了Zn和Cd诱导后藻体中多肽的含量变化，结果显示藻体中的多肽对金属具有诱导响应，其中小分子肽变化相对明显，随着碳链的增加，多肽对重金属的诱导响应滞后。

多肽；荧光标记；高效液相色谱；质谱表征；离子提取

多肽化合物(Phytochelatins，PCs)是由半胱氨酸、谷氨酸和甘氨酸组成的多肽，其分子量范围为2～4 kDa，化学通式为(γ-Glu-Cys)n-Gly(n=2～11)[1-2]。……