李茉莉，乔　琨

(1.湖南农业大学生物科学技术学院，湖南 长沙 410128；2.福建省水产研究所，福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室，福建 厦门 361013)



一种快捷的单细胞藻类计数方法
——运用Photoshop软件分析细胞显微图像轮廓

李茉莉1，乔琨2*

(1.湖南农业大学生物科学技术学院，湖南 长沙 410128；2.福建省水产研究所，福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室，福建 厦门 361013)

细胞计数是藻类培养、赤潮调查和环境监测中的一个重要环节。本文设计并测试了一种单细胞藻类计数方法：利用体视显微镜及配套的CCD数字成像系统，获取固定体积样品的全视野图像，运用Photoshop软件对细胞显微图像轮廓进行分析计数。根据细胞粒径差异，实验选取5种代表性单细胞藻类，分别采用新方法和显微镜计数法对其进行细胞密度测定。研究结果表明，新方法在测定亚心形扁藻(Platymonassubcordiformis)时，结果较显微镜计数明显偏低。而在测定东海原甲藻(Prorocentrumdonghaiense)、米氏凯伦藻(Kareniamikimotoi)、塔玛亚历山大藻(Alexandriumtamarense)和血红哈卡藻(Akashiwosanguinea)时，计数结果与显微镜计数结果非常接近，较可信。其计数结果与显微镜计数结果具有较好的线性相关性(R2≥0.981 1，P<0.01)。新方法能够有效测定粒径15 μm以上纯种或混合培养的单细胞藻类的生物量，简化了测定程序的同时，减少了人为误差，具有一定的应用价值。

单细胞藻类；藻类计数方法；Photoshop软件分析；细胞显微图像轮廓

在微藻培养和赤潮监测中，一般需要定时定点分析生物量来确定细胞生长状态及增殖情况。随着科技的进步，目前生物量测定的方法很多，包括显微镜计数法[1-2]、叶绿色a含量测定法[1-3]、可见分光光度法[4]、荧光分光光度法[5-8]、流式细胞显微计数法[9-11]、库尔特计数法[11]等。……