张云怡，梅玲玲，张俊彦，占　利，陈建才，陈鸿鹄，张　政，杨　勇



O3∶K6血清型副溶血性弧菌三重PCR检测方法的建立

张云怡，梅玲玲，张俊彦，占利，陈建才，陈鸿鹄，张政，杨勇

目的建立副溶血性弧菌O3∶K6血清型三重PCR检测方法。方法基于副溶血性弧菌种特异性基因toxR, O3血清群特异性基因vp0209，K6血清型特异性基因vp0230，建立O3∶K6血清型副溶血性弧菌三重PCR检测方法。对该方法的检测特异性和灵敏度进行分析。结果与结论该方法对O3∶K6血清型副溶血性弧菌具有很好的检测特异性，灵敏度可以达到102CFU/PCR反应体系。

副溶血性弧菌；O3∶K6血清型；三重PCR

副溶血性弧菌为革兰氏阴性杆菌或稍弯曲弧菌，主要存在于近海的海水、海底沉积物和鱼类、贝类等海产品中。自1950年被发现以来，该菌已经成为世界范围内因食用污染海产品而导致食物中毒的最主要的致病菌[1-2]。感染患者有腹泻、腹痛、恶心、发烧等典型胃肠炎和食物中毒症状[3]。在我国沿海地区，副溶血性弧菌引起的食源性疾病暴发在全部食源性疾病暴发中已占首位[4]。

副溶血性弧菌属于典型的多血清型致病菌，1996年在印度爆发了大规模副溶血性弧菌感染引发的流行病事件，并且迅速传播到了亚洲、南美洲、北美洲、非洲和欧洲的多个国家，波及上万民众。其中50%的临床分离株属于O3∶K6 血清型[5-6]。在全球传播过程中，O3∶K6 血清型快速进化出20多种衍生血清型(包括O4∶K68, O1∶K25,O1∶KUT等)。此后的研究发现副溶血性弧菌的某些血清型在临床和环境分离株中都存在，而某些血清型目前发现只存在于环境分离株中，说明某些血清型菌株与人类疾病的相关性更强[7]，在我国的副溶血性弧菌临床分离株中，O3∶K6和O4∶K8血清型菌株占据主导地位。……