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辽宁地区腹泻患者大肠杆菌分离株II型不耐热肠毒素的检测及测序分析

2016-08-24袁超文江馗语张力国刘文鑫

中国人兽共患病学报 2016年7期
关键词:检测

袁超文,江馗语,张力国,刘文鑫



辽宁地区腹泻患者大肠杆菌分离株II型不耐热肠毒素的检测及测序分析

袁超文1,江馗语2,张力国2,刘文鑫3

目的对辽宁地区人源性腹泻样本中致病性大肠杆菌(PathogenicEscherichiacoli)的毒力因子进行检测,掌握产II型不耐热肠毒素(Type II heat labile enterotoxin, LT-II)大肠杆菌在我国北方地区的流行现状并阐明LT-II与其他致病因子间的关系。方法于2014年3月至2015年3月收集辽宁地区人源性腹泻粪便样品,用麦康凯培养基和生化试验的方法分离出大肠杆菌,并用多重PCR方法对毒力基因(elt-II、elt-I、sta、stb、K88、K99等)进行检测,对分离到的LT-II阳性大肠杆菌中elt-II基因进行测序及分型。结果354份腹泻样品中共分离到携带有毒力因子的大肠杆菌139株,检出率为39.2%。毒力因子阳性大肠杆菌中,有12株携带elt-II(8.6%)基因。在12株携带elt-II的大肠杆菌中,2株单独携带elt-II,6株携带F1,1株携带K88,1株携带astA,2株携带irp2/astA;测序结果表明12株elt-II阳性大肠杆菌中有10株携带elt-IIc1亚型,2株携带elt-IIc4亚型。结论在引起人源性腹泻的毒力因子中有大肠杆菌II型不耐热肠毒的存在,且主要以LT-IIc1为主要流行型。

大肠杆菌 II型不耐热肠毒素;PCR检测;测序分析

致病性大肠杆菌(pathogenicE.coli)是引起人类和动物肠内外疾病的重要病原微生物,其中肠产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenicE.coli, ETEC)更是引起婴幼儿、幼龄动物和旅行者腹泻的主要病原菌[1]。肠毒素和菌毛是ETEC发挥致病作用的主要活性物质。首先,致病菌经口进入人或动物体的肠道后,通过菌毛(F1、K88、K99、987P、F18、F41)或非菌毛粘附素(AIDA-1、Paa)发挥定植作用将菌体固定在肠壁上,然后,ETEC可单独或同时合成耐热肠毒素(heat-stable enterotoxin,ST)或不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT)刺激肠上皮细胞分泌出大量的电解质和水,最终导致机体腹泻[2-3]。……

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