黄佳佳　张官嫦　谭　娜　杨晓荣　张苏园　姚　晋　郑　洪

(遵义医学院附属医院病理科，贵州　遵义　563003)



miRNA-206 靶向细胞周期蛋白D2调控神经胶质瘤细胞增殖

黄佳佳张官嫦1谭娜杨晓荣张苏园姚晋郑洪

(遵义医学院附属医院病理科，贵州遵义563003)

目的探讨miRNA-206在神经胶质瘤组织中的表达及其对神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法采用荧光定量PCR方法检测神经胶质瘤组织和细胞系中miRNA-206 的表达情况；通过四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)增殖实验检测miRNA-206对神经胶质瘤细胞T98G增殖的影响；生物信息学方法预测miRNA-206可能的靶基因，并采用荧光素酶报告基因实验验证预测的细胞周期蛋白D2(CCND2)是miRNA-206的靶基因；蛋白质印迹方法检测miRNA-206对CCND2表达的影响。结果miRNA-206在神经胶质瘤组织中的表达显著降低(P<0.01)，且神经胶质瘤恶性度越高，miRNA-206的表达越低(P<0.01)；同时，神经胶质瘤细胞系中miRNA-206的表达亦显著降低(P<0.01)；转染miRNA-206 mimics上调神经胶质瘤细胞T98G中miRNA-206表达后可显著抑制神经胶质瘤细胞T98G的增殖能力(P<0.01)，而转染anti-miRNA-206可增加神经胶质瘤细胞T98G的增殖能力(P<0.01)。通过TargetScan软件进行生物信息学预测显示CCND2为miRNA-206的功能性靶基因，且得到荧光素报告实验结果证实。蛋白质印迹结果显示转染miRNA-206可显著抑制神经胶质瘤细胞T98G中CCND2的表达。结论miRNA-206可通过调节CCND2的表达，进而抑制神经胶质瘤细胞T98G的增殖能力，神经胶质瘤组织中miRNA-206的低表达与神经胶质瘤的发生发展密切相关。

miRNA-206；神经胶质瘤；细胞周期蛋白D2

miRNA-206在多种肿瘤组织中存在异常表达，且与多种肿瘤的发生发展密切相关〔1,2〕。然而，关于miRNA-206在神经胶质瘤组织中的表达及其与神经胶质瘤发生发展的关系目前还很少有文献报道。本研究旨在探讨miRNA-206对细胞周期蛋白D2(CCND2)蛋白表达水平的影响及其调控神经胶质瘤进展的作用及相关机制。

1　材料与方法

1.1临床资料收集2012年1月至2014年1月于我院进行神经胶质瘤切除术的肿瘤及癌旁标本50例，均经病理证实为神经胶质瘤。年龄33～70〔平均(48.78±14.48)〕岁。根据WHO神经系统肿瘤分类标准进行病理分级。获取标本后迅速保存于液氮中。所有患者术前均未接受化疗和放疗。

1.2神经胶质瘤细胞系神经胶质瘤细胞系A172、U87MG、T98G、293ET和PC-3购自中国科学院上海生科院细胞资源中心，均培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，并置于37℃、5%CO2及饱和湿度的CO2孵箱中进行培养。……