张秀芳　孙　莹　赵　丹　白小雪　魏　静　华树成

(吉林大学白求恩第一医院呼吸科，吉林　长春　130021)



MEF2D在肺癌中的表达及其在肺癌细胞增殖与转移中的作用

张秀芳孙莹赵丹白小雪魏静华树成

(吉林大学白求恩第一医院呼吸科，吉林长春130021)

目的研究MEF2D在肺癌中的表达及其对肺癌细胞生物学行为的影响。方法收集30例肺癌组织标本，通过qPCR实验、蛋白免疫印迹实验和细胞免疫荧光实验检测MEF2D在肺癌组织和肺癌细胞系中的表达；通过细胞增殖实验和Transwell实验观察在敲除和过表达MEF2D后，肺癌细胞的增殖及转移能力。结果与癌周正常组织相比，肺癌组织中MEF2D mRNA表达水平显著提高(P<0.01)，肺癌细胞系(A549、H460、H1229)中MEF2D表达含量与正常肺成纤维细胞MRC-5相比含量升高(P<0.01)。与普通肺癌细胞相比，敲除了MEF2D的肺癌细胞增殖率下降，细胞转移能力降低；与对照组相比，过表达MEF2D的MRC-5增殖率升高，转移能力增强(P<0.01)。结论MEF2D在肺癌组织和肺癌细胞中高表达，且能促进肺癌的增殖及转移

肺癌；MEF2D；增殖；转移

目前肺癌发生、发展的分子机制还没有得到完全阐明，因此临床治疗无法明显提高肺癌患者生存率。近年来，人们发现转录因子-肌细胞增强因子2家族(MEF2)在肿瘤中起着重要的作用。本文拟检测MEF2D对肺癌细胞和正常成纤维细胞增殖、抗凋亡及转移能力的影响，为肺癌的临床诊断与治疗提供理论依据。

1　材料和方法

1.1实验细胞和标本来源A549、H460、H1229肺癌细胞和正常肺成纤维细胞MRC-5、人皮肤成纤维细胞BJ购买于American Type Culture Collection(ATCC)。全部细胞株均按照说明书推荐条件下，培养在37℃和5%CO2环境中，培养基为含10%胎牛血清的DMEM完全培养基。收集2012年8月至2014年8月吉林大学白求恩第一医院住院肺癌患者30例，将手术切下的肺癌及癌周组织放置于-80℃冰箱待用。

1.2主要试剂和仪器MEF2D 一抗、FITC 标记二抗：BD公司；对照质粒pcDNA-GFP：Addgene；CFX96 实时荧光定量检测系统：Bio-Rad Laboratories；TaqMan®2×Universal PCR Master Mix 试剂：Applied Biosystems；Trizol:Invitrogen；Rever Tra Ace qPCR RT 试剂盒：日本东洋；……