马兜铃酸作用下肾小管上皮细胞尾加压素Ⅱ、转化生长因子-β1的表达及相互关系
2016-08-15陈素贤万义增李敬岩
陈素贤 万义增 杨 悦 李敬岩 李 伦
(辽宁医学院附属第三医院病理科,辽宁 锦州 121000)
马兜铃酸作用下肾小管上皮细胞尾加压素Ⅱ、转化生长因子-β1的表达及相互关系
陈素贤万义增杨悦李敬岩李伦
(辽宁医学院附属第三医院病理科,辽宁锦州121000)
目的观察马兜铃酸(AA)作用下尾加压素(U)Ⅱ和转化生长因子(TGF)-β1在肾小管上皮细胞(NRK-52E)中的表达及相互关系。方法常规培养的NRK-52E细胞分别加入DMEM培养基、AA、AA+ UⅡ、AA+ UⅡ+抗UⅡ抗体,培养24、36、48 h,用RT-PCR技术检测UⅡ、TGF-β1mRNA表达水平。结果与DMEM组比较,AA组NPK-52E细胞UⅡ和TGF-β1基因表达均明显增强(P<0.05);与AA组比较,AA+ UⅡ组TGF-β1表达明显增强(P<0.01);与AA+ UⅡ组比较,AA+ UⅡ+抗UⅡ抗体组TGF-β1基因表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论AA作用下,NRK-52E细胞UⅡ和TGF-β1表达水平均升高,且UⅡ可诱导TGF-β1的表达,提示二者在AA肾病发生发展中可能有一定作用,且二者相互关联。
马兜铃酸;尾加压素Ⅱ;转化生长因子-β1
含马兜铃酸(AA)的药物主要在肾脏代谢,并且可以不断蓄积,且病变多为不可逆,成为许多老年患者肾衰竭的主要原因。尾加压素(U)Ⅱ是迄今发现的最强的体内缩血管活性物质,在肾脏尤其是近曲小管有丰富的表达。UⅡ及其受体mRNA在AA肾病的肾脏表达增强〔1〕。诸多研究表明,UⅡ在肾脏疾病中有一定作用。转化生长因子(TGF)-β1具有多种功能,在细胞的免疫调节、生长分化、损伤修复等方面发挥着重要作用。TGF-β1可诱导肾小管上皮细胞转分化〔2〕。UⅡ与TGF-β1在肾脏疾病中均有重要作用,但二者在AA发病中有无作用、有无关系及关系如何尚未见报道。本研究从细胞水平探讨AA作用下二者的表达规律及其相互关系。
1 材料与方法
1.1材料马兜铃酸钠购自中国药品生物制品检定所。DMEM为Gibco公司产品。UⅡ及抗UⅡ抗体购自Sigma公司。 Trizol、逆转录酶AMV 、TaqDNA聚合酶等购自新西兰Invitrogen公司。肾小管上皮细胞NRK-52E由吉林大学药学院药理与毒理学教研室馈赠。……
