真核细胞翻译起始因子4E在皮肤基底细胞癌中的表达
2016-08-13刘海东马伟元
邓 越 刘海东 庄 乐 马伟元
·论著·
真核细胞翻译起始因子4E在皮肤基底细胞癌中的表达
邓 越 刘海东 庄 乐 马伟元
目的: 检测皮肤基底细胞癌中真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)的表达。方法: 采用免疫组化PV-9000法和Real-time PCR法分别检测20例皮肤基底细胞癌及20名健康皮肤组织中eIF4E蛋白及mRNA的表达。结果: 基底细胞癌和健康皮肤组织中eIF4E蛋白MOD值分别为(0.198± 0.031)和(0.096±0.015),mRNA相对表达量分别为(2.32±1.00)和(1.24±0.17),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论: eIF4E可能参与皮肤肿瘤的发病过程。
基底细胞癌; 真核细胞翻译起始因子4E; 免疫组化; 实时荧光定量PCR
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1临床资料 收集2014年1月至2015年1月山东大学齐鲁医院皮肤科病理室诊断的BCC蜡块标
本20例。其中男女各半,年龄59~74岁,中位年龄68岁,病史1个月~12年。发病部位均为颜面部,其中眼周4例,鼻翼5例,鼻唇沟4例,面颊5例,颞部2例。病理分型:结节溃疡型9例,色素型5例,浅表型3例,硬皮病样型1例,腺样型2例。另取皮肤外科术中废弃的健康皮肤标本20例作为对照组,两组在年龄、性别、取材部位上相匹配。
1.1.2主要试剂 浓缩型兔抗人eIF4E多克隆抗体(货号:ab76256,规格:100 μL/支)购于美国Abcam生物工程有限公司,二步法免疫组化试剂盒(货号:PV-9000,规格:5 mL/支)、DAB显色液(货号:ZLI-9019,规格:10 mL/瓶)购于北京中杉金桥生物技术有限公司。离心柱型石蜡包埋组织RNA快速提取试剂盒(货号:RP5321,规格:50次)、Super M-MLV反转录酶(货号:PR6502,规格:10000 U)、2×Super SYBR real-time PCR premixture(货号:PR7031,规格:125次)购于北京百泰克生物技术公司,其它实验用品由山东大学齐鲁医院皮肤科实验室提供。
1.2方法
1.2.1免疫组化法检测eIF4E蛋白的表达 蜡块3 μm厚连续切片,常规脱蜡至水,EDTA(PH=9.0)修复液高温高压修复3.5 min,4℃冷却1 h。……
