三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究
2016-08-11贾芳芳崔海峰鲁亚辉王兆芹
韩 深,贾芳芳,崔海峰,刘 萤,鲁亚辉,王兆芹,桂 淦
(1.北京出入境检验检疫局,北京 100026;2.北京勤邦生物技术有限公司,北京 102206;3.北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心,北京 102206;4.合肥市畜牧水产技术推广中心,安徽合肥 230001)
三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究
韩 深1,贾芳芳2,3,崔海峰2,3,刘 萤1,鲁亚辉2,3,王兆芹2,3,桂 淦4
(1.北京出入境检验检疫局,北京 100026;2.北京勤邦生物技术有限公司,北京 102206;3.北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心,北京 102206;4.合肥市畜牧水产技术推广中心,安徽合肥 230001)
[目的]探讨系统地检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的方法。[方法]通过三甲氧苄氨嘧啶与马来酸酐反应,得到三甲氧苄氨嘧啶半抗原,再通过免疫动物得到抗三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体,并将其应用于能够检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的ELISA试剂盒。[结果]试验表明,该试剂盒对水质中三甲氧苄氨嘧啶的检测限为2.34 μg/kg,IC50(50%抑制浓度)为4.8 μg/L,回收率为60.5%~79.7%,试剂盒的标准曲线范围为0~80 μg/L,批内、批间的相对标准偏差均小于10%,三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体与二甲氧苄氨嘧啶的交叉反应率小于1%,4 ℃下能够保存12个月,稳定性较好。[结论]研究可为监管三甲氧苄氨嘧啶的滥用提供参考。
三甲氧苄氨嘧啶;单克隆抗体;ELISA试剂盒
三甲氧苄氨嘧啶(Synaprim,TMP)[1]属于二氨嘧啶类化合物[2],它是一种抗菌增效剂[3-4]。磺胺类药物单独使用,会使细菌很易产生耐药性,将三甲氧苄氨嘧啶与磺胺类药物组成复方制剂,可使细菌的叶酸代谢受到双重阻断,使抗菌谱扩大、抗菌活性增强,从抑菌作用变为杀菌作用,对多数革兰氏阳性菌和阴性菌有效,在兽医临床上应用十分广泛。……
