许莹　　李琦　　王斌全



儿童变应性鼻炎鼻分泌物嗜酸性粒细胞的临床研究

许莹1李琦1王斌全2

目的 了解变应性鼻炎儿童患者鼻腔分泌物中嗜酸性粒细胞分布情况以及季节对嗜酸性粒细胞分布情况影响。方法 对417例变应性鼻炎儿童患者及98例非变应性鼻炎儿童的鼻腔分泌物薄层涂片，经瑞-姬染色后观察嗜酸性粒细胞的数量及分布程度，417例变应性鼻炎患儿根据4个季节分为4个亚组，比较各季度亚组之间嗜酸性粒细胞的数量。结果 变应性鼻炎患儿鼻腔分泌物中嗜酸性粒细胞阳性人数显著高于非变应性鼻炎患儿人数（P＜0.001），变应性鼻炎儿童患者鼻腔分泌物中嗜酸性粒细胞数量显著高于非变应性鼻炎患者（P＜0.001），变应性鼻炎患儿在春夏秋冬不同季节鼻腔分泌物中嗜酸性粒细胞数量差异明显（P＜0.01），其中夏季高于冬季（P＜0.01），其他各个季节之间无明显差异（P＞0.05）。结论 嗜酸性粒细胞在儿童变应性鼻炎的发病过程中具有十分重要的作用，变应性鼻炎患儿鼻腔分泌物嗜酸性粒细胞明显上升，同时随着季节变化，嗜酸性粒细胞数量也变化明显，对儿童变应性鼻炎的诊断有重要参考价值。

儿童；嗜酸性粒细胞；变应性鼻炎；分泌物

近年来，随着物质生活的改善和提高，人们的生活方式和生态环境的急剧变化等多重因素的影响，儿童变应性鼻炎的患病率在世界范围内有明显升高，并呈逐年增长趋势。

1南京医科大学附属南京儿童医院耳鼻咽喉头颈外科（南京，210008）

2山西医科大学第一医院耳鼻咽喉头颈外科

变应性鼻炎是特异性个体接触致敏原后由IgE介导的介质释放，并有多种免疫活性细胞和细胞因子等参与的鼻黏膜的Ⅰ型变态反应，其变态反应过程中嗜酸性粒细胞（EOS）、肥大细胞会发生脱颗粒现象，在脱颗粒过程释放大量的趋化因子，趋化各种炎性细胞，其中，嗜酸性粒细胞趋化因子促使血液中嗜酸性粒细胞向变态反应炎症部位聚集，以致鼻腔分泌物中出现大量嗜酸性粒细胞。自1927年Eyermann涂片检查鼻分泌物中的EOS后，EOS细胞学检查开始用于临床。目前关于成人变应性鼻炎鼻腔分泌物中EOS研究较多，但是相对于儿童来说研究比较少，本研究通过分析417例AR儿童患者和98例非过敏性鼻炎儿童的鼻分泌物EOS细胞学观测，以探讨EOS在儿童变应性鼻炎临床意义。

资料与方法

1材料来源

随机选取南京市儿童医院2014年2月～2014 年12月耳鼻咽喉科门诊就诊的症状以多喷嚏多涕为主的慢性鼻炎患者515例，根据变应原皮肤点刺试验将患儿分为两组，实验阳性患儿417例定义作为观察组，其中男291例，女126例，3～15岁，平均年龄7.34±2.56岁。将实验阴性患者98例患儿定义为对照组，3～14岁，男62例，女36例，平均年龄6.96±2.77岁。两组患者的男女所占比例、年龄差异均无统计学意义，具有可比性。

2方法

观察组417例变应性鼻炎儿童患者，经过变应原皮肤点刺实验阳性（安刺，ALK-ABELLO，S2010040），并且过敏原与临床症状相关。对照组98例鼻炎患儿变应原点刺实验均阴性。515例患儿均以棉签取鼻腔分泌物，载玻片薄层涂片，瑞氏-吉姆萨染色（瑞氏吉姆萨A、B液，BasoLOT：410021，珠海贝索生物技术有限公司）后，显微镜（Olympus，CH20，Japan）10×40视野下观察，记录鼻腔分泌物中EOS分布程度和数量，EOS的分布程度采用Sheldon等的评价方法分成6个级别：①未见到EOS；②偶见到散在的EOS；③EOS相对较多且呈散在分布；④视野中EOS占1/4；⑤视野中EOS占1/2；⑥满视野都是EOS。级别≥2视为鼻腔分泌物中嗜酸性粒细胞分布为阳性。对阳性患儿，记录100个粒细胞中EOS的数量，级别1：未见到EOS患儿EOS数量默认为0。比较两组阳性人数，以及100个粒细胞中EOS的数量；同时，将观察组按照2014年农历四个季节分为四个亚组，其中春季103例（20140204-20140504）、夏季104例（20140505-20140806）、秋季107例（20140807-20141106）、冬季103例（20141106-20141210），比较四个季节100个粒细胞中EOS的数量。

3统计学处理

实验数据应用SPSS 12.0 for windows统计软件进行检验，组间阳性人数比较实用卡方检验，鼻腔分泌物中EOS分布程度用Mann-whitey＇s U检验，多个亚组之间鼻腔分泌物中EOS分布程度用Kruskal-wallis检验，P＜0.05为具有统计学差异，P＜0.01为具有显著性差异，P＜0.001为具有非常显著性差异。

结果

1观察组与实验组儿童鼻腔分泌物EOS数量比较

观察组患儿鼻腔分泌物EOS阳性人数为350例，阴性人数为67例，对照组患儿鼻腔分泌物EOS阳性人数为12例，阴性人数为86例，观察组阳性人数远远高于对照组，具有非常显著性差异（χ2= 195.28，P＜0.001）。观察组患儿鼻腔分泌物100个粒细胞中，EOS数量为68［19，93］，对照组患儿鼻腔分泌物100个粒细胞中，EOS数量为0［0，2］，观察组明显高于对照组，具有非常显著性差异（P＜0.001），见表1。

表1　两组EOS阳性人数，100个粒细胞中EOS数量比较（个，中位数［25%；75%］）

2春夏秋冬四季儿童鼻腔分泌物EOS数量比较

春夏秋冬四个季节患儿鼻腔分泌物100个粒细胞中EOS数量分别为春季3.00［2.00，56.00］，夏季60.00［5.00，91.00］，秋季50.00［2.00，90.00］，冬季12.00 ［3.00，44.00］，四组比较具有显著性差异（P＜0.01），其中两两比较显示，除了夏季EOS数量高于冬季，两组有统计学差异外（Z=-3.018，P=0.015），其他各亚组两两比较，春季与冬季（Z=-0.287，P=1.000）、秋季与冬季（Z=-2.476，P=0.080）、春季与秋季（Z=-1.869，P=0.369），春季与夏季（Z=-2.383，P=0.103）、夏季与秋季（Z=-1.345，P=1.000），EOS数量差异均无统计学差异，见表2。

表2　春夏秋冬鼻腔分泌物100个粒细胞中EOS数量（个，中位数［25%；75%］）

讨论

近年来，AR发病状况呈上升趋势，在我国中心城市AR的患病率为8.7%～24.1%。儿童AR患病率在世界范围内也有明显升高趋势，AR可发生于任何年龄包括幼婴时期，大多数患者于20岁前出现，是一种儿童常见病。国内外文献报道多达10%的儿童和20%的少年患常年性鼻炎，其中大多为变态反应性。由于儿童处在生长发育期，AR对儿童认知功能的影响引起广泛关注，AR虽不是一种严重疾患，但可以影响儿童日常生活、学习，且可诱发支气管哮喘、鼻窦炎、鼻息肉、中耳炎等相关疾病，己经成为困扰家长和医务人员重要的医学问题之一［1-3］。

EOS是变应性鼻炎的一个重要临床指标，成人变应性鼻炎患者鼻腔分泌物中嗜酸性粒细胞数量显著高于正常人及非变应性鼻炎患者，变应性鼻炎患者鼻腔分泌物中嗜酸性粒细胞阳性率也明显高于正常人和非变应性鼻炎患者［4-6］。变应性鼻炎分泌物中嗜酸粒细胞明显高于急性鼻炎分泌物中嗜酸粒细胞［7］，鼻用激素和舌下脱敏治疗都能明显减少患者鼻分泌物中EOS数量［8，9］。对于鼻分泌物EOS增高的AR患者，采用鼻用激素治疗能够抑制EOS炎症，改善AR患者的症状和体征。非EOS增高的AR患者对鼻用激素治疗反应性差，所以临床上可以根据EOS的相对计数决定是否采用鼻用激素治疗［10］。

成人变应性鼻炎依据典型的临床症状和体征不难诊断，而儿童病例的症状和体征有很大的变异，多不典型［11］。儿童变应性鼻炎有以流清涕为主，有以打喷嚏为主，有以鼻塞为主，儿童临床症状各有不同和侧重［12］，所以鼻分泌物中EOS%可作为儿童AR诊断和疗效评定的指标，对于儿童患者，EOS的检测更具有临床意义［9］。

本研究中，515例患儿使用皮肤点刺实验来定义变应性鼻炎或非变应性鼻炎患者，且患病以来均未应用相关治疗。417例变应性鼻炎儿童患者鼻分泌物中EOS检出350例，阳性率83.93%，98例非变应性鼻炎儿童患者鼻分泌物EOS检出12例，阳性率12.24%，变应性鼻炎儿童鼻分泌物EOS检出阳性率和嗜酸性粒细胞占整个粒细胞的比例都明显高于非变应性鼻炎患者，符合AR的发病机制和发病过程。各个亚组比较，春冬两个季节，患儿鼻分泌物中EOS数量较低，夏秋两季EOS较高，但除了其中夏季EOS数量高于冬季，其他季节之间EOS数量差异均无统计学意义，本次患儿过敏前7位过敏原分别是粉尘螨87.5%、屋尘螨85.4%、热带五爪螨73.9%，霉菌14.3%、花粉10.7%，猫毛5.2%，狗毛5.1%，尘螨是最主要的过敏原，热带螨和霉菌的生长条件与尘螨也比较类似，这与南京地区变应性鼻炎患儿主要致敏原是尘螨这种常年性过敏原结果吻合［13］。尘螨最佳的生长条件为温度20～25℃、相对湿度70%～75%［14］，南京地区夏秋季节的气温和湿度适合尘螨生长繁殖，春季EOS较低也说明花粉不是南京地区引起过敏性鼻炎的主要诱因。

417例过敏性鼻炎儿童仅67例未有EOS检出，鼻分泌物EOS检出29例见大量的中性粒细胞，这不排除近期局部有感染的可能。相反，鼻窦炎患者血中嗜酸性阳离子蛋白及嗜酸性粒细胞趋化因子增高也会导致非过敏性鼻炎患者鼻腔分泌物EOS明显增高，这也是影响实验的一个方面。

总之，鼻腔细胞学是一种安全、便捷、高效的检测方法，是指导鼻腔疾病诊断和治疗的极好指标，对于儿童患者鼻腔分泌物EOS分布程度在2级及以上，即为鼻腔分泌物EOS阳性，加上患者症状及体征即可临床诊断AR。因此，鼻腔分泌物EOS涂片检查对AR的诊断有重要参考价值，是AR的一项重要诊断性试验，针对儿童变应性鼻炎症状不典型的特点，可以与变应原皮内试验联合，增加AR诊断的准确性。

1魏红梅.小儿过敏性鼻炎100例疗效观察日.中国现代药物应用，2009，（12）：52-53.

2肖柳红，汪菊萍，郑碧珍.儿童过敏性鼻炎发病情况及其生活状况的调查.护理研究，2003，18（6）：415-416.

3Vichyanond P，SuratannonC，Lertbunnaphong P，et al. Clinical characteristics of children with non-allergic rhinitis vs with allergic rhinitis.Asian Pac J Allergy Immunol，2010，28（4）：270-274.

4凌永伟，欧阳贵平，谢洪亮，等.变应性鼻炎患者鼻腔分泌物中嗜酸性粒细胞的检测.中国耳鼻咽喉颅底外科杂志，2012，18（1）：59-60.

5禹华玮，徐大韬，李筱勇.变应性鼻炎患者鼻黏膜分泌物嗜酸性粒细胞观察.华北煤炭医学院学报，2005，11（6）：703-704.

6刘新梅，郭建红，吴鹏飞，等.变应性鼻炎患者血清总IgE和鼻分泌物嗜酸性粒细胞的变化.农垦医学，2000，22 （3）：176-177.

7张传栋.变应性鼻炎与急性鼻炎患者鼻分泌物中嗜酸粒细胞及IgE的比较.医学检验与临床，2009，20（2）：63-64.

8孟庆翔，谢景华，苏芳，等.变应性鼻炎患者舌下含服粉尘螨滴剂免疫治疗早期鼻分泌物嗜酸细胞计数变化及临床意义.山东大学耳鼻喉眼学报，2010，24（3）：36-39.

9吴昆，李泽卿，于卫东，等.布地奈德喷鼻治疗变应性鼻炎儿童鼻分泌物嗜酸性粒细胞的变化.实用儿科临床杂志，2010，25（10）：767-768.

10罗鸿，张建斌，余晔，等.根据变应性鼻炎患者鼻分泌物嗜酸粒细胞计数调整类固醇治疗的临床意义.临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2012，26（11）：494-498.

11Simon FER.Allergic rhinitis：The ashma allergic rhinitis link.The Journal of Allergy and Clinical Immunology， 1999，104（1）：34.

12彭晓欣.过敏性鼻炎的防治.中国疗养医学，2009，18 （3）：213-214.

13Peng Li，Qi Li，Zhenghua Huang，et al.E？cacy and safety of house dust mite sublingual immunotherapy in monosensitized and polysensitized children with respiratory allergic diseases.International Forum of Allergy&Rhinology，2014：1-6.

14崔玉宝.尘螨的生物学、生态学与流行概况.国外医学寄生虫分册，2004，31（6）：277-281.

（收稿:2015-02-02修回：2015-08-24）

Children allergic rhinitis nasal secretions of eosinophils in clinical research

XU Ying，LI Qi，WANG Binquan
Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery，Nanjing Children′s Hospital，Nanjing Medical University，Nanjing，210008，Jiangsu，China

Objective To study the distribution of eosinophils in nasal secretions of children with allergic rhinitis and the effect of seasons on the distribution of eosinophils.Methods Nasal secretions of 417 children with allergic rhinitis and 98 children with non allergic rhinitis were made into thin smear，after Wrihgt Giemsa staining to observe the number and distribution of eosinophils.417 cases of children with allergic rhinitis were divided into four subgroups according to the four seasons，then compared the number of eosinophils of each quarter between subgroups.Results The eosinophils in nasal secretions positive number of Children with allergic rhinitis was significantly higher than that of children with non allergic rhinitis（P＜0.001），the number of eosinophils in nasal secretions of children with allergic rhinitis was significantly higher（P＜0.001），in spring，summer，autumn and winter seasons，the difference of the number of eosinophils in nasal secretions between children with allergic rhinitis was significant（P＜0.01），which was higher in summer than in winter（P＜0.01），while no obvious difference was between every other seasons（P＞0.05）.Conclusion The eosinophils in children with allergic rhinitis plays an important role in the process，the eosinophils in nasal secretion of children with allergic rhinitis rises obviously and changes with the seasons，in addition，the number of eosinophils also varies obviously，which have important reference value in the diagnosis of children with allergic rhinitis.

Children；Eosinophils；Allergic rhinitis；Secretion

李琦，副主任医师.Email:liqi52002101@163.com