王艳萍，朱贺，刘欢，马克涛，司军强，李丽

[石河子大学医学院 生理学教研室（新疆地方与民族高发病教育部重点实验室），新疆 石河子 832000]



论著

缺氧对乳鼠耳蜗螺旋神经节神经元外向电流的影响及其环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷含量变化的研究*

王艳萍，朱贺，刘欢，马克涛，司军强，李丽

[石河子大学医学院 生理学教研室（新疆地方与民族高发病教育部重点实验室），新疆 石河子 832000]

摘要：目的观察缺氧时间对体外培养的耳蜗螺旋神经节神经元（SGNs）外向电流的影响及其细胞内第二信使环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）含量变化。方法体外原代培养新生1～3d SD大鼠SGNs并进行免疫荧光鉴定。用膜片钳全细胞记录模式观察缺氧外液灌流SGNs时，外向电流的变化趋势和特点。用酶联免疫吸附实验检测缺氧5、15和20min时SGNs内cAMP和cGMP的浓度变化。结果①酶解分离可获得生存状态良好的神经元，经免疫荧光鉴定为SGNs。②当电压钳制在-60mV时，急性缺氧增强SGNs外向电流，主要增强0～+60mV电压区间的激活电流幅度。缺氧5min时，+60mV激活电流幅度从（971.2±50.3）pA增强到（2361.0±207.4）pA，差异有统计学意义（P<0.01）。随后出现下降趋势，11～15 min时，增强的电流幅度与对照组基础电流比较，差异无统计学意义（P>0.05）。③分别检测缺氧5、15和20min后SGNs中cAMP和cGMP的含量变化。缺氧5min组与正常对照组比较，cAMP浓度升高，差异有统计学意义（P<0.01）。缺氧15min组与正常对照组比较，cAMP浓度变化差异无统计学意义；缺氧20min组与正常组对照组比较，cAMP浓度水平下降（P<0.01）。cGMP浓度随着缺氧时间的延长，总体呈下降趋势，但在20min后有部分回升（缺氧15minvs缺氧20min，P<0.01）。结论在SGNs急性缺氧损伤过程中，外向电流增强，增强幅度随缺氧时间变化先升后降，推测在短期缺氧时细胞通过降低兴奋性，影响听觉信息的传导，且该过程与胞内第二信使cAMP和cGMP浓度的改变相关。

关键词：缺氧；SGNs；环磷酸腺苷；环磷酸鸟苷

听觉障碍是指听觉系统中的传音、感音、听神经和/或其各级听觉中枢发生病变，导致听功能出现障碍，而发生不同程度的听力下降[1]。围生期窒息缺氧导致脑的缺氧缺血性损害是影响新生儿听力的高危因素[2]。耳蜗及听觉中枢对缺氧极为敏感，当缺氧、缺血时首先累及耳蜗组织，使耳蜗产生类似于脑缺氧时兴奋性氨基酸受体过度激动而引起的神经中毒。……