石莹　陈肖潇　樊学军　田绿波　杨雨　张薇薇



·技术方法·

GeXP联合多重PCR系统在腹泻病毒检测中的应用

石莹陈肖潇樊学军田绿波杨雨张薇薇

610041 成都，四川出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心(石莹、陈肖潇、樊学军、田绿波、杨雨)；610500 成都医学院公共卫生系(张薇薇)

【摘要】目的利用GeXP系统结合多重PCR技术，建立诺如病毒(GI和GII组)、轮状病毒、星状病毒的方法。方法根据4种病毒的序列特征，制备病毒标准品质粒，收集病原体样本，利用GenBank下载4种病毒的核苷酸序列，根据4种病毒的序列特征，利用GeXP express Profiler设计特异性引物，优化条件使GeXP系统能够特异性、快速的检测对应病毒。评价其灵敏度、特异性及功效，并应用于120份临床标本检测。结果优化后的引物能特异性的检测各病毒，无交叉反应；灵敏度为100%，特异性为99.53%，功效为99.62%，与荧光定量PCR检测结果一致性为99.51%，检测浓度最低至5×103/μl拷贝，在已知临床样本灵敏度高、特异性好。结论GeXP方法的建立为快速、准确的检测这4种腹泻病毒提供了便利，对口岸突发群体性腹泻的病原体检出有重要意义。

【主题词】腹泻病毒；GeXP；多重PCR

Fund programs: General Administration of Quality Supervision, Inspection and Quarantine Public Benefit Research Foundation of China (201210046)；General Administration of Quality Supervision, Inspection and Quarantine Research Foundation of China (2014IK064)；Sichuan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau Research Foundation (SK201402)

病毒性腹泻因其传播速度快，临床上难区分，给诊断及治疗带来了极大的困难。引起病毒性腹泻的主要病原体有轮状病毒、诺如病毒、肠道腺病毒和星状病毒等[1]。诺如病毒是成人病毒性腹泻最主要的原因，其次依次为轮状病毒、星状病毒和腺病毒[2-3]。诺如病毒根据其基因特征，主要分为6个基因型，GI、GII 和GIV基因型主要感染人类，而GIII 和GV可感染猪、牛和鼠[4]。……