番红花对糖尿病大鼠的降血糖作用

2016-08-05王丹丹姜东莉张沐新

中国老年学杂志 2016年13期

关键词：降血糖糖耐量

王丹丹　姜东莉　李　锐　张沐新

(上海中医药大学，上海　201203)

番红花对糖尿病大鼠的降血糖作用

王丹丹姜东莉1李锐1张沐新2

(上海中医药大学，上海201203)

〔摘要〕目的探讨番红花对2型糖尿病大鼠模型的降血糖作用。方法通过链脲佐菌素(STZ)腹腔注射+高糖饮食，成功建立了2型糖尿病Wistar大鼠模型，随机分为番红花组(低、中、高剂量)和二甲双胍组。连续给药28 d，观察番红花对血糖、蔗糖糖耐量的影响以及对钙蛋白酶10基因表达的影响。结果中、高剂量番红花可明显降低血糖，升高蔗糖糖耐量，同时钙蛋白酶10 基因的表达量上升明显。结论番红花能降低高血糖2型糖尿病模型大鼠血糖，提高蔗糖糖耐量，对钙蛋白酶10 基因的表达具有增强作用。

〔关键词〕番红花；降血糖；糖耐量

番红花(Crocus sativus L)为鸢尾科多年生草本植物，又名藏红花，西红花〔1〕，为名贵中药，具有清热解毒、除瘀活血、安神镇静等多种药效学功效。近年研究表明，番红花具有一定的抗肿瘤效果，其良好的药理活性使其成为研究的热点〔2～4〕。本研究通过链脲佐菌素(STZ)腹腔注射+高糖饮食，成功建立了2型糖尿病大鼠模型，发现番红花对2型糖尿病模型大鼠有较好的降血糖作用，同时促进了钙蛋白酶10基因的表达。

1材料与方法

1.1试剂盐酸二甲双胍(中美上海施贵宝制药有限公司，批号：H20023370)，STZ(购自Sigma公司，批号：S0130)；葡萄糖(山东华鲁制药有限公司，批号：140728)；蔗糖(青岛捷世康生物科技有限公司，批号：20140913)；番红花购自北京同仁堂(亳州)有限责任公司，SYBER Green 荧光染料，购自thermo fisher公司，引物序列合成于上海捷瑞公司。

1.2动物雄性Wistar大鼠70只(180～200 g)，SPF级，购自南京君科生物工程有限公司。藏红花水煎浓缩溶液1 ml/100 g (每毫升含生药100 mg)。

1.3方法Wistar大鼠经高糖饮食28 d后，腹腔注射STZ(30 mg/kg)，诱发Wistar大鼠高血糖2型糖尿病，5 d后，对注射STZ的Wistar大鼠禁食不禁水12 h，尾静脉采血进行血糖测定。选择血糖值>13.2 mmol/L的Wistar大鼠为高血糖2型糖尿病模型，成功建模50只，随机分为模型组、二甲双胍对照组150 mg·kg-1·d-1，番红花高剂量组及番红花中剂量组、番红花低剂量组分别为150、100、50 mg·kg-1·d-1。灌胃给药1次/d。给药后第4、14、21、28天尾静脉取血，测定大鼠空腹血糖值，并于尾静脉取血1 h后，采用GOD-PAP法测定0、1.0、2.0、3.0 h的糖耐量。同时对第四周尾静脉的血液进行RNA提取，逆转录后用实时荧光PCR测定钙蛋白酶10基因的表达情况。针对钙蛋白酶10基因(genbank登录号：XM_009072508)设计引物，上游引物序列：5′-agcagtgttt agaagattaatg-3′，下游引物序列：5′-ggattcgcagcaggaagatttcctt-3′，PCR反应条件95℃ 10 min，95℃ 15 s，60℃ 1 min,40个循环，用SDS v2.3软件进行基因表达分析。

1.4统计学分析采用t检验。

2结果

2.1给药28 d大鼠模型血糖值变化注射STZ 6 d后，检测空腹血糖值显著升高，证明造模成功。结果说明番红花对2型糖尿病模型大鼠的降血糖作用是呈时间和剂量依赖的。见表1。

2.2给药28 d后大鼠模型糖耐量变化中、高剂量给药组可提高血糖2型糖尿病模型大鼠蔗糖耐量，并呈剂量依赖，见表1。

2.3钙蛋白酶10基因的表达情况用药4 w后，番红花中、高剂量组的钙蛋白酶10 基因表达量均有明显上升，分别较模型组上调3.54和2.95倍，而盐酸二甲双胍组、模型组对照组及番红花低剂量组钙蛋白酶10基因表达量未发生明显变化。说明高、中剂量的番红花有上调钙蛋白酶10 基因表达的作用。见图1。

表1　给药28 d对2型糖尿病大鼠血糖值和糖耐量的影响变化

与模型组比较：1)P<0.05，2)P<0.01

g:番红花高剂量组；z:番红花中剂量组；d:番红花低剂量组；m:模型对照组；y:盐酸二甲胍组图1　给药4 w对2型糖尿病大鼠模型钙蛋白酶10基因表达的影响

3讨论

番红花中的番红花苷类成分是中药番红花的主要的活性成分。已有研究证实〔7，8〕，此苷类成分具有降压、降糖、降脂、抗炎、护肝及抗肿瘤等药效学活性。

钱之玉〔9〕研究证实了从栀子及其他药材中提取的番红花苷对在大鼠等动物的高脂血症模型具有显著的调节血脂作用。晋玉章等〔10〕研究发现，一定剂量番红花对实验模型动物可起到明显的降血、降脂的作用，同时升高对蔗糖的糖耐量。本研究结果显示，在本实验条件下的番红花中、高剂量组能够降低血糖值，与此同时能够改善高血糖2型糖尿病模型大鼠对蔗糖的糖耐量。由此可见，番红花具有可降低高血糖2型糖尿病模型大鼠的高血糖并且具有改善糖耐量的作用。本研究提示番红花的降糖作用机制可能与钙蛋白酶10 基因有关。

4参考文献

1刘瑛，古天明，周红.西红花苷类成分药理作用研究概况〔J〕.成都大学学报，2008；27(1)：16-8.

2Molnar T，Szabo D，Pusztai R，etal.Membrane associated antitumor affects of cosine ginsenoside and cannabinoid derivates〔J〕.Anticancer Res，2000；20(2A)：861-5.

3张宏，张俊国，张伶，等.西红花有效成分合成研究进展〔J〕.化学研究与应用，2009；21(6)：794-9.

4王妍，李洁.西红花中西红花苷的研究进展〔J〕.化工科技市场，2010；33(6)：1-5.

5彭云波.消渴丸治疗2型糖尿病临床研究〔J〕.中医学报，2013；28(182)：1044-5.

6张波，王亚非，刘雪丽，等.TNF-α对短期胰岛素强化治疗诱导短病程2型糖尿病长期缓解的预测作用〔J〕.中国康复医学杂志，2009；24(6)：547-9.

7费曜，周滢，朱丹平，等.栀子对糖尿病大鼠肾脏的保护作用〔J〕.中国老年学杂志，2013；33(1)：115-8.

8绪广林，余书勤，龚祝南，等.西红花苷对大鼠实验性高脂血症的影响及其机制研究〔J〕.中国中药杂志，2005；30(5)：369-72.

9钱之玉.西红花苷调血脂作用的实验和临床研究〔J〕.中国执业药师，2009；6(2)：6-9.

10晋玉章，谢文利，何瑞波.西红花苷对高脂血2型糖尿病模型大鼠降血糖和降血脂作用〔J〕.武警医学院学报，2009；18(3)：197-200.

〔2015-12-06修回〕

(编辑李相军)

基金项目：吉林省科技厅国际合作项目(20140414053GH)

通讯作者：张沐新(1976-)，女，副教授，主要从事天然药物化学研究。