付德来，种　铁，李和程，张 鹏，刘洪涛，王子明

(西安交通大学医学院第二附属医院：1.泌尿外科，2.麻醉科，陕西西安　710004)



·基础研究·

Shotgun技术筛选尿液中肾癌蛋白质标志物

付德来1，种铁1，李和程1，张 鹏1，刘洪涛2，王子明1

(西安交通大学医学院第二附属医院：1.泌尿外科，2.麻醉科，陕西西安710004)

摘要：目的寻找尿液中潜在的肾癌蛋白质标志物。方法收集肾癌患者根治性肾切除术前、术后、非肾癌对照者晨起第二次中段尿液标本，提取尿蛋白并经SDS-PAGE初步分离，尿蛋白酶解后通过高效液相色谱联合电喷雾串联质谱分析，结果整合后经Bioworks Browser 3.1软件搜索SWISS-PROT和/或TREMBL人类蛋白质数据库，鉴定差异蛋白。结果肾癌患者术前组、术后组、对照组分别收集获得满足条件的尿液标本32、32、34份，各组蛋白浓度分别为32.79、9.15、26.57 ug/uL，各组分别鉴定获得独特肽段727、679、753个，独特肽段数≥1的蛋白群分别有278、237、259个，独特肽段数≥2的蛋白群分别有83、92、106个。其中有5个独特肽段数≥2的蛋白群在肾癌术前组特异表达，这5个蛋白中4个为免疫球蛋白类，1个为Lipocalin-2(LCN2)。结论LCN2在肾癌患者术前尿液中高可信表达，LCN2在肾癌发生、发展中的作用及其作为尿液中肾癌标志物的意义值得进一步研究。

关键词：肾癌；标志物；尿液；蛋白组学

肾癌又称肾细胞癌，是最常见的肾脏恶性肿瘤。约30%肾癌患者在首次就诊时已处于疾病晚期，目前晚期肾癌缺乏有效的治疗手段，预后较差。寻找肾癌标志物对于提高肾癌的早期诊断水平，研究肾癌发病机制具有重要意义。尿液是寻找肾癌标志物的理想标本，我们前期通过磁珠联合MALDI-TOF-MS技术从多肽组的层面对尿液中肾癌标志物进行了初步探讨，发现了数个有意义的差异表达多肽峰。……