梅洁花 崔 冬 王 勤 温鹏强 徐明国 唐 根 刘 琮 李成荣 王国兵

·论著·

急性期川崎病γ干扰素组蛋白乙酰化改变及意义初探

梅洁花1,3崔 冬1,3王 勤2温鹏强1徐明国1唐 根1刘 琮1李成荣1王国兵1

目的 探讨急性期川崎病(KD)患儿IFN-γ组蛋白乙酰化改变及其在KD免疫发病机制中的作用。方法 以2015年2月至2016年6月深圳市儿童医院诊断并住院治疗的KD患儿为KD组，经IVIG治疗后为KD-IVIG组，KD组依冠状动脉有无损伤分为冠状动脉损伤(KD-CAL+)亚组和无冠状动脉损伤(KD-CAL-)亚组，于IVIG治疗前、后取血备检；同期体检的健康儿童为对照组。采用染色质免疫共沉淀法检测外周血CD4+T细胞IFN-γ组蛋白H3乙酰化水平及组蛋白乙酰化酶p300和去乙酰化酶HDAC1/2结合水平；流式细胞术检测外周血CD4+IFN-γ+细胞(Th1)比例及IFN-γ、pSTAT4、pSTAT5和T-bet蛋白表达水平；实时荧光定量PCR检测CD4+T细胞IFN-γ、IL-2Rα/β、IL-12Rβ1/2、IL-18Rα/β和ITLR4 mRNA表达；ELISA检测外周血浆中IL-12、IL-2和IL-18浓度。结果 ①KD患儿38例(男20例)，年龄1～5.2岁；KD-CAL+亚组16例，KD-CAL-亚组22例。对照组32例(男17例)，年龄1.2～4.9岁。KD组和对照组年龄、性别差异无统计学意义。②急性期KD患儿Th1细胞比例、IFN-γmRNA和蛋白表达及其组蛋白乙酰化水平显著高于对照组(P<0.05)，且KD-CAL+亚组高于KD-CAL-亚组(P<0.05)，经IVIG治疗后明显恢复(P<0.05)。③急性期KD患儿CD4+T细胞IFN-γ组蛋白乙酰化酶p300结合水平显著增加(P<0.05)，HDAC1/2结合水平明显降低(P<0.05)，p300/HDAC1/2明显高于对照组且与IFN-γ组蛋白H3乙酰化水平呈正相关 (r=0.52;P<0.05)，经IVIG治疗后均有所恢复(P<0.05)。其中KD-CAL+亚组p300结合水平及p300/HDAC1/2比值均高于KD-CAL-亚组 (P<0.05)，而HDAC1/2结合水平则低于后者(P<0.05)。④急性期KD患儿血浆IL-2、IL-12和IL-18浓度显著增高(P<0.05)，CD4+T细胞表面受体IL-2Rα/β、IL-12Rβ1/2、IL-18Rα/β和TLR4及其下游信号分子pSTAT5、pSTAT4、T-bet和MyD88表达明显上调(P<0.05)，且KD-CAL+亚组前述各项均高于KD-CAL-亚组(P<0.05)，经IVIG治疗后均有不同程度恢复(P<0.05)。结论 IFN-γ组蛋白过度乙酰化可能是导致急性期KD患儿免疫功能紊乱的重要因素之一。

川崎病； IFN-γ； 组蛋白乙酰化； Th1细胞； 免疫

川崎病(KD)是一种急性免疫功能紊乱所致的全身血管炎综合征，其病因及发病机制迄今仍未完全阐明[1-3]。Ⅰ型辅助性T细胞(Th1)是一类介导机体细胞免疫功能的T细胞亚群，其数量或功能异常可导致自身免疫性疾病的发生[4-6]。IFN-γ是Th1细胞分泌的标志性细胞因子，在其分化、成熟及免疫功能中发挥着重要作用。研究已证实外界刺激或细胞微环境改变可导致Th1细胞IFN-γ蛋白表达及功能异常[7-9]，但调节IFN-γ表达的分子机制尚不完全清楚。……